冰冻切片快速病理知多少

病理学检查在诊断疾病、制定治疗方案、判断预后及总结治疗经验等方面起着举足轻重的作用。病理切片是病理标本的一种。制作时，将部分有病变的组织或脏器经过各种化学试剂处理和石蜡包埋，使之固定硬化；在切片机上切成薄片后，粘附于玻片上，染以各种颜色；通过显微镜以观察病理变化作出病理诊断，为临床诊断和治疗提供帮助。然而，常规石蜡切片远远不能满足于手术科医生工作的需要。如果想在手术中马上了解肿瘤或病变的性质，以便确定手术方案和范围，就需要应用快速冰冻切片技术作出快速病理诊断。

快速冰冻切片的定义

快速冰冻切片也称为冰冻切片，是将术中切下的病变组织在冰冻切片机中迅速冷冻后，于30 min内完成制片和做出病理诊断的一项技术，免去了常规的固定、脱水、石蜡包埋等过程。

快速冰冻切片的作用

术中冰冻是一项高效且实用的技术，既能帮助医生有效切除病变组织，又能在最大程度上减少手术的伤害。

（1）确定病变是否为肿瘤，并判断肿瘤良、恶性，以确定下一步手术方案。

（2）了解肿瘤有无播散到邻近淋巴结或脏器，确定手术切缘有无肿瘤浸润，以了解手术范围是否足够大。

（3）帮助识别手术中某些意外和确定可疑的微小组织，比如甲状旁腺、输卵管、输精管等。

（4）显示组织中的脂肪和脂类物质，常见于脂肪瘤、肉瘤等。

快速冰冻切片的适用及不适用范围

适用范围

择期手术时，需要确定病变性质，比如是肿瘤还是非肿瘤、是良性病变还是恶性病变等，以决定手术方案的标本；了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋巴结转移等；确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留；切除组织的确认，如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。

不适用范围

疑为恶性淋巴瘤；标本的检查长度≤2 cm；术前易于进行常规活检者；脂肪组织、骨组织和钙化组织；需要依据核分裂象计数判定良、恶性的软组织肿瘤；主要根据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤；已知具有传染性疾病（结核病、病毒性肝炎、艾滋病等）的标本。

快速冰冻切片的具体操作步骤

快速冰冻切片需要临床医生、病理医生、病理技术员以及标本送检员共同完成。

术前

术前，临床医生与患者签署《术中快速冰冻知情同意书》，告知其意义和局限性，向病理科提交《术中冰冻申请单》，并填写患者的病史、重要检查结果等信息。

术中

术中，临床医生取出标本后立即装入标本袋，连同《病理组织检验送检单》一同迅速送至病理科。

病理检验

病理科接收标本后，核对标本信息并登记。取材医生观察标本，选取疑似病变组织交给病理技术员进行冰冻切片。冰冻切片包括冰冻包埋和制片两部分，常规病理一般需要十几个小时的脱水，再用石蜡制成“蜡块”，而术中冰冻只需要使用0CT包埋剂做支撑，利用低温1～3 min就可将标本快速变成一个“冰疙瘩”。制片是将标本置于包埋托上，用冰冻切片机切成6～8 μm厚的切片，贴于预处理载玻片上，迅速放入固定液中，染色4～5 min。之后，切片交给诊断医生进行显微镜观察，完成术中病理诊断，并出具规范的病理报告送交临床医生。

快速冰冻切片与常规石蜡切片的区别

术中快速病理现在一般采用特殊的冰冻设备将标本快速冰冻并切片，从接到标本至出报告一般在30 min。术中快速病理的开展大大提高了临床手术术式的选择和准确性，特别对妇科卵巢肿瘤、普外两腺进一步选择手术术式有帮助。

常规病理一般采用石蜡切片，是把快速冰冻切剩下的可疑病灶用蜡油浸泡包埋，做成一个蜡块，然后慢慢通过层层取材，用不同的试剂进行染色。这个过程非常繁琐和复杂，有时候一种试剂的染色无法区分还要换另一种试剂，进行第二次、第三次，甚至第四次的染色区分。因此，石蜡切片至少要5～10 d才能得出结果。碰到无法明确、疑难的病理，还要召集科室的病理医生一起讨论，重新做免疫组化，之后再讨论，才能下最后的诊断意见。

但是，做完术中快速冰冻病理后一定还要进行常规石蜡切片诊断，并且要以后者为准，因为常规的石蜡切片成像质量远比快速冰冻切片好。

快速冰冻切片的优缺点

快速冰冻切片的优点

快速冰冻切片简便，不需要对组织固定、脱水、透明、包埋等手续即可进行切片，减少了一些中间环节，切取的组织变化也不大，正常情况下30 min内即可完成诊断工作；提高手术成功率，解决高难手术术中的诊断问题；避免患者二次手术，减少其手术痛苦。

快速冰冻切片的缺点

不容易做连续切片或较薄的切片；切取的组织不能过大，否则不易冻结或者组织冻结不均，影响切片及染色效果；组织块在冻结过程中容易产生水的结晶，组织结构不如石蜡切片清晰；未经过组织脱水透明等步骤，镜下图像不如石蜡切片清楚，容易造成误诊；体积较大的肿瘤发生局灶癌变时，可能因冰冻取材受限不能全取而漏诊；某些情况下，冰冻病理检查仅能提供一个参考性意见或推迟至石蜡切片才能明确病变性质；肿瘤钙化部分无法冰冻制片。

快速冰冻切片的发展趋势

随着医疗技术的不断进步，快速冰冻切片技术也在不断发展。

自动化和智能化

随着自动化和人工智能技术的发展，快速冰冻切片的过程正在变得越来越自动化。从样本准备到切片制作，再到染色和观察，许多步骤都可以通过机器自动完成，不仅提高了效率，还减少了人为错误的可能性。

多色和多模态成像

为了满足复杂疾病诊断的需要，多色和多模态成像技术正在被越来越多地应用于快速冰冻切片中。这允许医生在同一时间观察多种不同的组织特征，提高了诊断的准确性。

绿色环保

随着环保意识的提高，快速冰冻切片技术的发展也开始考虑环保和安全问题。例如，使用更环保的冷冻剂、减少废弃物产生等措施，确保处理过程中的安全性，避免对操作人员和患者造成伤害。