食品及饲料脂肪检测方法的优化开发

摘 要：对食品、饲料、蛋及蛋制品中脂肪检测方法进行探讨，并提出一种改进后新的脂肪测定方法，以酸水解-索氏抽提法为基础，对实验条件进行改进后，新方法能够同时满足食品、饲料、蛋及蛋制品中脂肪的测定。通过数据比较，新方法的相对标准偏差为0.81%～3.76%。与不同产品脂肪检测国家标准方法相比，相对误差平均值在0.77%～1.75%。新方法的提出，为实验室及日常检验检测工作提供了一个实验更加便捷、准确度更好、污染更小、试剂回收率更好的检测方法。

关键词：脂肪；食品；饲料；蛋及蛋制品；酸水解；索氏抽提

Abstract： Discussion on fat detection methods in food， feed， eggs and egg products， and propose a new improved fat determination method. Based on the acid hydrolysis-Soxhlet extraction method， and improving the experimental conditions， the new method can meet the requirements for the determination of fat in food， feed， eggs and egg products. Through data comparison， the average relative deviation of the new method is 0.81%～3.76%. Compared with the national standard method for fat detection of different products， the average relative error is 0.77%～1.75%. The proposal of the new method provides a detection method with more convenient experiment， better accuracy， less pollution and better recovery rate of reagents for laboratory and daily inspection and detection work.

Keywords： fat; food; feed; eggs and egg products; acid hydrolysis; soxhlet extraction

随着生活质量的提高，人们越来越关注不同食品中的脂肪含量。目前，食品中脂肪的检测方法多采用《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》（GB 5009.6—2016）[1]；特殊食品，如鸡蛋则采用《蛋与蛋制品卫生标准的分析方法》（GB/T 5009.47—2003）[2]进行检测；饲料等宠物食品采用《饲料中粗脂肪的测定》（GB/T 6433—2006）[3]。不同产品类型检测方法的条件不同，需要根据经验进行选择。不同产品国家标准检测方法比较见表1。

除了国家标准检测方法外，国内外也提出了很多新型脂肪检测方法，如近红外光谱法[4]、超临界萃取法[5]等，于晓英等[6]提出直接采用乳脂计对方便面食品中的脂肪进行测定，取得了较好的数据。本文通过对酸水解脂肪检测方法进行优化及开发，对普通食品、禽蛋产品、饲料中脂肪测定进行数据比较，开发出一种更适用于日常检验检测、精确度更好、检测效率更高、更加节约成本的检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

盐酸溶液（1+1）、石油醚（沸程30～60 ℃），均为分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司；实验用样品均为日常抽检及委托样品。

1.2 仪器与设备

分析天平（BSA224S），梅特勒托利多公司；脂肪提取仪（Soxtectm8000），BUCHI瑞士步琦有限公司；鼓风干燥箱（DHG-9055A），上海一恒科技有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 样品制备

分析样品选用实验室日常检验用具有代表性的样品，如有必要需进行四分法取样，取样后充分混匀，粉碎后装入自封袋内备用。对于液体样品摇匀备用。

1.3.2 试样称量及水解

称取试样3～4 g于50 mL具塞比色管中，水分含量较低的固体样品，加入5 mL水搅拌均匀后，加入1+1盐酸溶液10 mL，振荡分散样品；对于半固态及液态样品，直接加入盐酸溶液（1+1）10 mL，振荡分散样。将分散后的样品管置于80 ℃水浴锅中水解2 h（视样品情况而定，至水解完全），水解期间至少振荡试样管2～3次，以促进样品分散及水解。

水解完成后，将水解液转移至滤纸上过滤，并反复用热水洗涤滤纸3～4次，直至滤液为中性（蓝色石蕊试纸检验不变色），每次洗涤时热水不要过量，以防止水解产物损失，影响最终的检测结果。连同漏斗将滤纸及其水解产物放入105 ℃干燥箱内干燥1 h后取出，备用。

1.3.3 水解产物的抽提

将冷却后滤纸定量转移至脂肪提取仪纸筒内，以30～60 ℃石油醚为提取溶剂，按照设定的浸提程序进行索氏抽提。

对于脂肪含量不同的产品，采用1次抽提（脂肪低于15%采用1次抽提即可达到提取效果）或2次抽提（脂肪含量高于15%的样品，进行1次抽提后，更换接收罐进行2次抽提可达到提取效果）以达到充分淋洗的目的。1次抽提程序设定为沸腾20 min、淋洗40 min、回收20 min；二次抽提程序的设定为沸腾15 min、淋洗30 min、回收15 min。

1.3.4 油脂称量

抽提完成后取出接收器（接收器提前于105 ℃干燥箱中干燥1 h后冷却称重，待用），置于105 ℃烘箱中干燥1 h后取出置于干燥器内，室温放置30 min后称量。重复以上操作直至恒重（需要根据样品脂肪含量调整浸提程序及次数，以达到充分浸提的效果）。

1.4 脂肪含量的计算

脂肪含量计算公式为

2 结果与分析

2.1 精密度实验

选取6种具有代表性的样品进行精密度实验，平行测定6次，测定结果详见表2。6种样品的相对标准偏差（Relative Standard Deviation，RSD）为0.81%～3.76%，平均相对标准偏差为1.97%，表明方法重复性良好。

2.2 食品中脂肪含量结果与国家标准方法比对数据

分别采用实验室方法与《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》（GB 5009.6—2016）国家标准方法，对18批次食品类样品进行脂肪检测，相对误差0%～4.55%，平均相对误差1.75%，见表3。

2.3 饲料中脂肪含量结果与标准方法比对数据

《饲料中粗脂肪的测定》（GB/T 6433—2006）指出，在检测B类产品中脂肪的过程中，盐酸水解过程中需要不断振摇，否则样品极易黏附在锥形瓶壁上造成检测结果偏低的现象，且在后续抽提过程中，需要连续抽提至少6 h才能保证样品脂肪提取完全，此过程大大降低了检测效率。使用本实验方法后，检测效率提升，避免了由于微沸回流水解可能导致的检测结果偏低的现象，且水解更加完全，整个抽提程序仅需要1.5 h即可完成。分别采用本实验方法与《饲料中粗脂肪的测定》（GB/T 6433—2006）国家标准方法，对饲料类（含宠物食品）样品进行脂肪检测，相对误差为0%～2.70%，平均相对误差为0.77%，见表4。

2.4 蛋与蛋制品中脂肪含量结果与标准方法比对数据

《蛋与蛋制品卫生标准分析方法》（GB/T 5009.47—2003）中，脂肪采用三氯甲烷冷浸法进行提取测定，但三氯甲烷毒性较大，且在浸提过程中，需要至少洗涤浸提管10次才能达到浸提效果，否则脂肪检测数据偏低，不能达到提取效果，本方法能将蛋制品脂肪检测统一到普通食品脂肪检测中，使检测效率及准确度都得到显著提升。分别采用本方法与《蛋与蛋制品卫生标准分析方法》（GB/T 5009.47—2003）国家标准方法，对蛋及蛋制品进行脂肪检测，相对误差为0%～2.11%，平均相对误差为0.88%，见表5。

3 结论

作为四大核心营养素之一，脂肪的测定一直是检测机构的重点检测项目。通过对现有不同产品国家标准检测方法的整合及改进，新的检测方法不但能够同时满足不同基质产品中脂肪含量的测定，在检测效率、数据准确度及操作适用性等方面都有显著提升。本方法的相对标准偏差为0.81%～3.76%，平均相对标准偏差为1.97%。针对食品、饲料、蛋及蛋制品进行分类数据比对，其结果相对误差分别为1.75%、0.77%、0.88%，结果远远低于国家标准10%、5%以及3%，方法适用性强。利用索氏抽提对水解后的脂肪进行提取，还可以对提取溶剂进行回收利用，也可以避免脂肪水解提取液在转移过程中的损失。

参考文献

[1]国家食品药品监督管理总局，国家卫生和计划生育委员会.食品安全国家标准 食品中脂肪的测定：GB 5009.6—2016[S].北京：中国标准出版社，2016.

[2]中华人民共和国卫生部.蛋与蛋制品卫生标准的分析方法：GB/T 5009.47—2003[S].北京：中国标准出版社，2003.

[3]国家标准化管理委员会，国家质量监督检验检疫总局.饲料中粗脂肪的测定GB/T 6433—2006[S].北京：中国标准出版社，2006.

[4]代启虎，马晨晨，李冉.近红外光谱分析技术在食品脂肪含量测定上的应用[J].广东化工，2017，44（2）：58-59.

[5]何钢，谢涛，谢碧霞.超临界CO2萃取测定食品中总脂肪的研究[J].经济林研究，2003，21（3）：28-31.

[6]于晓英，贾薇，张大鹰，等.方便面中脂肪测定新方法的研究[J].中国卫生检验杂志，2003，13（6）：699-700.

作者简介：苗蕾（1987—），女，辽宁锦州人，硕士，高级工程师。研究方向：食品及化工产品检验检测。