拟黑多刺蚁对仓鼠胆固醇代谢的影响

基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目（32001709）；广东省基础与应用基础研究基金区域联合基金项目（22202107190000486）；国家重点研发计划项目（2022YFE0139500）。

作者简介：胡泓臣（1998—），男，四川成都人，硕士在读。研究方向：食品营养与安全。

通信作者：朱寒月（1991—），女，河南商丘人，博士，讲师。研究方向：食品营养与安全。E-mail：zhuhanyue29@163.com。

摘 要：为研究拟黑多刺蚁对高胆固醇饮食仓鼠血脂和肠道菌群的影响，选用叙利亚金黄地鼠为模型，设置无胆固醇添加组（Non-Cholesterol Diet，NCD）、高胆固醇饮食组（High Cholesterol Dite，HCD）和添加拟黑多刺蚁粉末的高胆固醇饮食组（Polyrhachis vicina Roger High Chelosterol Diet，PRD），饮食干预六周后，PRD组仓鼠血清中总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（High-Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）、非高密度脂蛋白胆固醇（Non-High-Density Lipoprotein Cholesterol，Non-HDL-C）质量浓度相比HCD组分别上升16.20%、95.48%、9.52%、22.88%，HDL-C/TC比值下降4.00%。与HCD组相比，PRD组仓鼠肝脏中HMG-CoA-R基因相对表达量显著升高48.92%，肝脏胆固醇质量浓度升高52.38%，肝脏脂质质量浓度升高19.19%。综上所述，饮食中添加拟黑多刺蚁会加剧仓鼠血脂异常，使肝脏中HMG-CoA-R基因表达水平升高、肝脏胆固醇和肝脏脂质浓度上升。本研究为指导拟黑多刺蚁的食用及相关食品开发提供了安全性参考。

关键词：拟黑多刺蚁；胆固醇代谢；心血管疾病

The Effects of Polyrhachis vicina Roger on Cholesterol Metabolism in Hamsters

HU Hongchen， SHEN Feifan， PAN Jingjin， WANG Weiyan， LIN Huiqi， ZHU Hanyue*

（Foshan University， Foshan 528000， China）

Abstract： In order to investigate the effects of Polyrhachis vicina Roger on blood lipids and gut microbiota in hamsters subjected to a high cholesterol diet， Syrian golden hamsters were selected as the model. Three groups were established： a group with non-cholesterol supplementation （NCD）， a high cholesterol diet group （HCD）， and a high cholesterol diet group supplemented with Polyrhachis vicina Roger powder （PRD）. After six weeks of dietary intervention， compared to the HCD group， the PRD group exhibited an increase of 16.20% in total cholesterol （TC）， 95.48% in triglycerides （TG）， 9.52% in high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， and 22.88% in non-high-density lipoprotein cholesterol （Non-HDL-C） concentration in the hamster serum， while HDL-C/TC ratio decreased by 4.00%. Compared with the HCD group， the relative expression of HMG-CoA-R gene in the liver of the hamsters in the PRD group was significantly increased by 48.92%， the mass concentration of liver cholesterol was increased by 52.38%， and the mass concentration of liver lipid was increased by 19.19%. In conclusion， the inclusion of Polyrhachis vicina Roger in the diet exacerbated blood lipid abnormalities in hamsters， leading to elevated 3-Hydroxy-3-Methylgtutaryl-CoA Reductase （HMG-CoA-R） gene expression levels， increased cholesterol and lipid concentrations in the liver. This study provides a safety reference for the consumption of Polyrhachis vicina Roger and the development of related food products.

Keywords： Polyrhachis vicina Roger; cholesterol metabolism; cardiovascular disease

近年来，心血管疾病（Cardiovascular Disease，CVD）已经成为全球范围内致死人数最多的疾病，血脂异常是心血管疾病的重要危险因素。血脂异常主要表现为血液中总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、非高密度脂蛋白胆固醇（Non-High-Density Lipoprotein Cholesterol，Non-HDL-C）和甘油三酯（Triglyceride，TG）质量浓度升高（本文中“含量”“浓度”均代表质量分数）和高密度脂蛋白胆固醇（High-Density Lipoprotein Cholesterol）浓度降低。血脂异常会引起众多心血管疾病，如动脉粥样硬化、脂肪肝、冠心病、心梗、心律失常等[1]。

拟黑多刺蚁（Polyrhachis vicina Roger），又名双齿多刺蚁、大黑蚂蚁、大黑蚁等，是节肢动物门、昆虫纲、膜翅目蚁科昆虫，广泛分布于中国、印度、马来西亚、斯里兰卡和孟加拉国，国内主要分布在广西、广东、安徽等地[3]。1993年，国家卫生部将拟黑多刺蚁定为药食两用无害的优良蚁种，作为传统的可食用昆虫，其在民间的食用方式有烹调后食用、泡酒饮用、晒干后食用等。作为中药材，拟黑多刺蚁具有解毒消肿、活血化瘀、抗炎镇静、补肾益精等功效，常被用来治疗失眠、痔疮、脱发、月经不调等症[2]。以往的研究显示，拟黑多刺蚁中含有多种氨基酸、微量元素[3]及脂肪酸[4]，经热风干燥后，其蛋白质含量高达56.6%[5]。但目前尚未有拟黑多刺蚁对血脂影响的研究报道。

仓鼠是公认的研究胆固醇代谢的优秀模型，本研究以拟黑多刺蚁为研究对象，以仓鼠为实验模型，模拟人们高胆固醇饮食习惯，探究拟黑多刺蚁对高胆固醇模型仓鼠血脂的影响，对心血管疾病的防治和人们健康水平的提升具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

拟黑多刺蚁采集自广西横县，秋冬至立春时段进行采集，除去杂物后自然晾干，冷冻干燥72 h，磨成粉末后贮存在-20 ℃冰箱用于后续实验。

实验选用仓鼠品种为叙利亚金黄地鼠，购于北京维通利华实验动物有限公司（动物生产许可证号SCXK（京）2022-0051，动物使用许可证号：SYXK（粤）2020-0235），雄性，7周龄；胆固醇、蛋氨酸，购于Sigma生物试剂有限公司；TC、TG、HDL-C试剂盒，购于美国Stanbio公司；胆酸、石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、N，O-双（三甲基硅）三氟乙酰胺配制试剂[N， O-Bis （Trimethylsilyl） Trifluoroacetamide with Trimethylchlorosilane，TMS]，购于上海麦克林生化科技有限公司；WCGENE mRNA cDNA合成试剂盒、WCGENE mRNA qPCR定量试剂盒，购于上海沃吉基因。

1.2 仪器与设备

高速离心机，型号为Eppendorf 5424R；高速离心机，型号为湘仪L550；紫外可见分光光度计，型号为普析TU-1810；高效气相色谱仪，型号为安捷伦7890b；冷冻干燥机，购于宁波新芝生物科技股份有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 拟黑多刺蚁成分分析

根据《食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》（GB 5009.168—2016）第二法测定脂肪酸组成及含量；根据《食品安全国家标准 食品中胆固醇的测定》（GB 5009.128—2016）第二法测定胆固醇含量；根据《食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定》

（GB 5009.124—2016）测定氨基酸组成及含量；根据《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》

（GB 5009.5—2016）第一法测定蛋白质含量；根据《食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》

（GB 28050—2011）测定碳水化合物含量；根据《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》（GB 5009.6—2016）

第二法测定脂肪含量。

1.3.2 制备鼠粮

将仓鼠分为3组，即无额外胆固醇饮食组（Non- Cholesterol Diet，NCD），模拟中国人饮食习惯，满足仓鼠每日所需胆固醇以外不添加额外胆固醇；高胆固醇饮食组（High Cholesterol Dite，HCD），在NCD组基础上，额外添加胆固醇，其添加量相当于成年人每日摄入一个鸡蛋的胆固醇；添加拟黑多刺蚁粉末的高胆固醇饮食组（Polyrhachis vicina Roger High Chelosterol Diet，PRD）。在实验预备阶段，测得拟黑多刺蚁粉末蛋白质含量为53.3%，碳水化合物含量为16.2 g/100 g，脂肪含量为10.4 g/100 g。PRD组鼠粮以拟黑多刺蚁粉末为部分蛋白质来源，替代50%酪蛋白，同时相应地减少猪油与淀粉的添加量，以确保与HCD鼠粮的能量含量相同，详细配方见表1。

1.3.3 动物喂养与样本采集

24只叙利亚金黄地鼠适应喂养一周后，将其随机分为3组，每组8只，每两只一笼，于23 ℃，每天光照12 h的环境饲养，每周记录两次体重、摄食量。第0周开始与第6周结束时分别对每只鼠进行尾部采血，使用试剂盒测其血液中TC、TG、HDL-C浓度，第6周喂养结束时将鼠进行二氧化碳窒息处死，取部分组织，用生理盐水冲洗并称重，所有组织存放于-80 ℃冰箱直至分析。

1.3.4 血脂数据测定

根据相应试剂盒说明书指示分别测定与计算金黄地鼠血液中的TC、TG、HDL-C含量，使用SPSS软件进行数据统计学分析。