分光光度法测定白酒中甲醛

摘 要：目的：参考《发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法》（GB/T 5009.49—2008）中发酵酒中甲醛的检测方法，建立分光光度法检测白酒中甲醛的可靠方法，并通过线性范围、线性拟合度、精密度、加标回收率及检出限等检验方法的可行性。方法：采用乙酰丙酮显色法，样品为直接取样稀释，经过沸水浴加热后冷却于415 nm波长处测定吸光度。结果：甲醛标准曲线在0～20 μg时存在最佳线性关系，相关系数R2为0.999 7;

高中低3组加标实验的平均回收率分别为98.98%、96.26%和95.53%，6组平行样结果的相对标准偏差分别为0.011%、0.014%和0.028%;方法的检出限为0.078 μg。结论：该方法具有检测范围广，线性表现良好，在工作曲线全范围内均有较好的加标回收率，且实验平行性好，精密度高等优点，适用于白酒中甲醛的检测。

关键词：分光光度法;白酒;甲醛

Determination of Formaldehyde in Baijiu by Spectrophotometry

WANG Xin， JIN Rong

（Lishui Quality Inspection and Testing Research Institute， Lishui 323000， China）

Abstract： Abstract： Referring to  the detection method of formaldehyde fermented wine in GB/T 5009.49—2008， a reliable method for detecting formaldehyde in Baijiu is established by spectrophotometry， and the feasibility of testing methods in terms of linear range， linear fit， precision， standard recovery rate and detection limit. Method： Acetylacetone color development method was used. The sample was directly sampled and diluted. After heating in a boiling water bath， the absorption was cooled at a wavelength of 415 nm. The results show that the formaldehyde standard curve has the best linear relationship in the range of 0～20 μg， with a correlation coefficient R2 of 0.999 7; the average recovery rates of the three groups of standardization experiments in senior high school and low levels are 98.98%， 96.26% and 95.53% respectively， and the relative standard deviation of the results of the six parallel samples was 0.011%， 0.014% and 0.028%， respectively; the detection limit of the method is 0.078 μg. Conclusion： This method has a wide detection range， good linear performance， a good standard recovery rate in the whole range of the working curve， good experimental parallelism and high precision， and is suitable for the detection of formaldehyde in liquor.

Keywords： spectrophotometry; Baijiu; formaldehyde

白酒作为蒸馏酒重要的一个分支，以其悠久的历史，独特的风味，深受国内外消费者欢迎。每年各地市场监管部门都会对预包装白酒和散装白酒进行大量监督抽检，不合格的项目主要集中在卫生指标氰化物、甲醇以及食品添加剂的非法添加[1-2]。随着人们对白酒品质的关注度越来越高，其他监督检验未涉及的有害物质如甲醛含量等指标开始受到重视。2006年，甲醛被国际癌症研究机构（International Agency for Research on Cancer，IARC）确认为Ⅰ类致癌物[3]。美国环境保护局（US Environment Protection Agency，US EPA）规定了甲醛的每日可接受摄取量（Acceptable Daily Intake，ADI）为0.2 mg/kg[4]。测定酒中微量甲醛的方法主要有乙酰丙酮比色法和4-氨基-3-联氨-5-巯基-1-2-4-三氮杂茂分光光度法。另外，有研究报道了采用高效液相色谱法和气相色谱法衍生后检测食品、空气等样品中的甲醛含量[5]。本文依据乙酰丙酮显色法的原理，旨在建立一套分光光度法检测白酒中甲醛的方法，并验证其可行性。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

甲醛，上海安谱公司，含量10 000 mg/L水溶液;乙酰丙酮，上海凌峰化学试剂有限公司，纯度99.0%;乙酸铵，江苏强盛公司，纯度98.0%;冰乙酸，麦克林公司，纯度99.5%。

1.2 仪器与设备

北京普析通用仪器T9CS双光束紫外分光光度计;梅特勒-托利多ME204电子天平。

1.3 实验方法

1.3.1 实验原理

甲醛在过量乙酸铵的存在下，与乙酰丙酮和氨离子生成黄色的2，6-二甲基-3，5-二乙酰基-1，4-二氢吡啶化合物，在波长415 nm处有最大吸收，在一定浓度范围内，其吸光度与甲醛含量成正比，与标准系列比较定量[6]。

1.3.2 试剂的配制

乙酰丙酮溶液。称取乙酰丙酮0.4 g、乙酸铵25 g、冰乙酸3 mL溶于水中，用水定容至200 mL容量瓶中备用，临用现配。

甲醛标准溶液。准确移取0.5 mL的10 000 mg/L甲醛标准溶液至50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成100 mg/L甲醛储备液，准确移取0.5 mL的100 mg/L甲醛储备液至50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成1 mg/L甲醛标准溶液备用。

1.3.3 检测方法

移取2.0 mL白酒于25 mL比色管中，加水至10 mL后加入2 mL新配制的乙酰丙酮溶液，摇匀后在沸水浴中加热10 min，取出用水冲至常温后于415 nm测定吸光度。

2 结果与分析

2.1 标曲线性范围及线性相关系数

分别准确吸取1.0 μg/mL的甲醛标准溶液0 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.00 mL及100.0 μg/mL的甲醛标准溶液0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL和5.00 mL于25 mL比色管中，加水至10 mL刻度，后加入2 mL乙酰丙酮溶液，沸水浴中加热10 min，取出冷却后测定吸光度，绘制标准曲线。各浓度甲醛溶液的吸光度及散点图见表1和图1。

分析上述数据可知甲醛含量在0～200 μg均有较好的线性表现，其线性拟合的相关系数均不低于0.999，进一步比较可知在甲醛含量0～10 μg有最佳的拟合曲线，其截距最接近于零点，工作曲线为y=0.019 4x-0.000 2，线性相关系数R2=0.999 7。通过分析可以得出该方法具有检测范围广，线性表现良好等特点。

2.2 加标回收率与精密度实验

分别进行3组高中低浓度的加标实验，加标量分别为1 μg、5 μg和20 μg，并同时做6组平行样，得到的结果见表2。

由表2可知，高中低3组加标实验的平均回收率分别为98.98%、96.26%和95.53%，6组平行样结果的标准偏差分别为0.011%、0.014%和0.028%。实验结果表明该检测方法在工作曲线全范围内均有较好的加标回收率，且实验平行性好，精密度高。

2.3 检出限的测定

实验以色谱级无水乙醇代替白酒样品作为空白样品，平行测定11份空白样品溶液，以测定空白溶液响应值的3倍标准偏差所对应的甲醛含量作为检出限。标准偏差s，标准曲线斜率k。方法检出限为3s/k。由表3可知，该方法的检出限为0.078 μg，以样品取样量2 mL计算，其检出限浓度为0.039 mg/L，标准偏差为5.05×10-4。

3 结论

通过参考国家标准中发酵酒中甲醛的检测方法，本文顺利建立了分光光度法测定白酒中甲醛的检测方法，并对该方法的可行性进行了论证，结果表明该方法能够实现白酒中甲醛的检测目标，适用于白酒的检测与研究。

参考文献

[1]杨可，祝凤岚.国家食药监通告双沟、唐朝等40余批次白酒不合格[J].广西质量监督导报，2016（4）：27-28.

[2]资名扬.长沙县白酒小作坊监督抽检结果分析[J].现代食品，2021，27（10）：189-191.

[3]IARC. Formaldehyde， 2-butoxyethanol and 1-tert-bu-toxypropan-2-ol[J].IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans，2006，88：1-478.

[4]SOMAN A， QIU Y， LI Q C. HPLC-UV method development and validationfor the determination of low level formaldehyde in a drug substance [J].JChromatogr Sci，2008，46（6）：461-465.

[5]佟琦，黄丹丹，王文琪，等.常见食品甲醛含量的调查[J].粮油食品科技，2010，18（5）：48-50.

[6]中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会.发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法：GB/T 5009.49—2008[S].北京：中国标准出版社，2008.