辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价
作者: 刘国丽 肖军 陈珣 马晓颖 龚娜
摘 要:为筛选出适宜辽宁地区以玉米秸秆为主要栽培基质的优良糙皮侧耳菌株,以19个糙皮侧耳菌株为试验材料,对菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率及农艺性状等指标进行测定和比较分析。结果表明,C14号菌株综合指标优于其他供试菌株,其母种和栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势均较好,生物学效率较高,为105.8%,子实体菌盖颜色深灰色,菌柄3.1~6.8 cm,朵大韧性好,菇型紧凑,菌盖肥厚,中等大小,光泽好,可作为生产用优良菌株。C10、C2号菌株子实体性状一般,但其母种及栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势强、生物学效率高,利用秸秆能力强,可作为品种选育的备选材料。
关键词:糙皮侧耳;菌丝;玉米秸秆;筛选评价
中图分类号:S646.1+41 文献标志码:A 文章编号:1673-2871(2024)02-106-06
Screening and evaluation of Pleurotus ostreatus cultivars cultivated on corn straw substrate in Liaoning province
LIU Guoli, XIAO Jun, CHEN Xun, MA Xiaoying, GONG Na
(Institute of Edible Fungi, Liaoning Academy of Agricultural Sciences, Shenyang 110161, Liaoning, China)
Abstract: In order to screen the best strains of Pleurotus ostreatus suitable for cultivation with corn straw as the main substrate in Liaoning region, 19 P. ostreatus strains were used as test materials in this study, the growth rate of mycelia in PDA, the time of filling the bag, the contamination rate in cultivation bag, the biological efficiency and the agronomic characteristics of 19 strains were compared. The results showed that the growth of mycelia of stock culture and cultivation bag were not completely corresponding to the biological efficiency of fruiting body. In production, mycelium growth, fruiting body traits, biological efficiency and other index should be comprehensively considered for the selection of strains. The comprehensive characteristics of strain C14 were best, although the mycelium growth in PDA and corn stalk matrix were moderate, but its biological efficiency was high, its fruiting body was dark and compact, with short stalk, large and tough type, thick and medium size cap and thick edge. It can be used for the production of excellent strains. The fruiting body character of strain C10 and C2 were general, but their parent species and straw cultivation substrate had excellent characters on fast growth, biological efficiency and strong straw utilization ability, which could be used as an alternative parent material for breeding.
Key words: Pleurotus ostreatus; Mycelia; Corn stalk; Screening and evaluation
糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)是我国主栽食用菌种类之一,富含蛋白质、矿物质、维生素及多种生物活性物质[1],还具有较高的保健价值,开发前景广阔。由于糙皮侧耳生长发育快,生物学效率高,抗逆性和抗杂性强,栽培方法简单易行,深受生产者青睐。栽培基质主要为棉籽壳、玉米芯、木屑等,糙皮侧耳产业规模不断发展壮大,对传统基质的需求不断增加,导致生产成本逐年攀升,影响产业的健康发展,急需寻找新型栽培基质,就地取材,降低成本。玉米秸秆中含有丰富的纤维素、木质素、半纤维素和粗蛋白,具有较高的利用价值[2]。糙皮侧耳菌丝分泌多种胞外酶,包括漆酶、纤维素酶、半纤维素酶等[3],能够分解利用多种富含木质纤维素的栽培基质[4-5]。
辽宁省是我国玉米主要产区,秸秆资源丰富,尽管综合利用率在逐年提高,但仍有大量秸秆被废弃,尤其是作为食用菌基料化利用的占比很低。另外,由于食用菌菌株的生物学特性、农艺性状易受环境条件影响,同一菌株在不同区域、不同栽培基质情况下呈现较大差异[6]。因此,依据辽宁省气候特点、栽培模式及秸秆资源开展糙皮侧耳优良菌株筛选评价研究,不仅有利于农业废弃物的资源化利用,还能缓解食用菌栽培原料短缺和价格上涨的问题,促进当地食用菌产业健康可持续发展。
笔者以前期初步筛选获得的19个糙皮侧耳菌株为试验材料,通过比较分析各菌株的菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率等指标,对各菌株特点进行综合评价,以期筛选出适合辽宁地区以玉米秸秆为基质的优良菌株,为新品种选育提供优异资源,为实现对辽宁地区玉米秸秆高效资源化利用奠定基础,为糙皮侧耳良种推广提供理论和技术支撑。
1 材料与方法
1.1 材料
糙皮侧耳供试菌株19个,名称及具体编号见表1,均保藏于辽宁省农业科学院食用菌研究所。
1.2 方法
1.2.1 母种制作 采用加富PDA培养基,配方为:马铃薯200 g,葡萄糖20 g,MgSO4 1.5 g,KH2PO4 1.5 g,蛋白胨3 g,琼脂粉18 g,去离子水1000 mL,pH自然。马铃薯去皮、切片,加水煮微沸30 min左右至酥而不烂,然后用纱布过滤,补充滤液至1000 mL,加热后再加入葡萄糖20 g、MgSO4 1.5 g、KH2PO4 1.5 g、蛋白胨3 g,琼脂18 g,充分溶解后趁热分装到18 mm×180 mm的试管中,每管约10 mL,加胶塞后121 ℃下灭菌30 min。无菌操作台上接种试管种,25 ℃培养待菌丝长满管备用。
1.2.2 原种制作 采用麦粒培养基进行原种制作,配方为:麦粒98%、石膏2%。将无虫蛀、无霉变的小麦用沸水煮1 h至麦粒无白芯,沥水捞出后按比例添加石膏充分混合拌匀装入500 mL的罐头瓶中,封口膜封口后,在121 ℃下灭菌1 h。在接种室内无菌条件下接入母种,然后放入25 ℃培养箱中发菌20 d,菌丝长满瓶后待用。
1.2.3 栽培种制作 2020年1月17日制作菌袋。培养料配方为:玉米秸秆和玉米芯78%、麦麸20%、石膏1%、石灰1%,含水量65%。称取原材料,加水拌匀,使料含水量为65%。装入规格为17 cm×35 cm×0.05 cm的菌袋,每袋装料900 g,常压灭菌10 h。待冷却至室温后,无菌条件下接入麦粒原种,每个品种接种40袋,置于室内避光培养,2月26日移至出菇大棚,不同菌株间随机区组排列,按常规方法进行出菇管理。
1.3 项目测定
1.3.1 母种菌丝长势 在无菌条件下,用直径0.5 cm的打孔器对已经活化好的菌种平板进行打孔,然后将菌饼接入到装有加富PDA培养基直径9 cm平板的中央,置于25 ℃恒温培养箱中黑暗培养。每日观察菌丝生长情况,培养6 d后以“十字划线法”量取菌落直径,比较各菌株菌丝生长情况。每组设置3次重复。
菌丝生长速率/(cm·d-1)=菌落半径/菌丝生长天数。 (1)
1.3.2 栽培种菌丝生物学性状 在栽培种发菌过程中定期观察记录各个菌株的菌丝长势、颜色、满袋时间,统计污染率。
污染率/%=污染菌包数量/总菌包数×100。(2)
1.3.3 子实体生物学性状及产量 当子实体长至七八分熟时进行采收,观察测量子实体生物学性状及产量。每个菌株随机选择子实体5个,进行生物学性状测定,包括各菌株子实体的颜色、菌柄长度、韧性、菌盖形状,统计单袋产量,并计算生物学效率。
生物学效率/%=子实体鲜质量/培养料干质量×100。 (3)
1.4 数据统计分析
采用Microsoft Excel 2010进行试验数据整理,采用SPSS19.0进行差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 不同糙皮侧耳菌株在母种培养基上长势情况
不同糙皮侧耳菌株在PDA培养基上菌丝生长情况差异显著。由表2可知,母种菌丝颜色分为白色和洁白2种,其中C1、C2、C4、C5、C6、C7、C8、C10、C15、C18号菌株菌丝为洁白,其余均为白色。从菌丝密度和均匀度来看,C1、C2、C5、C6、C10、C18号菌株菌丝浓密,其中C2、C6、C10、C18号菌丝均匀;C4、C11、C13号菌丝较均匀且稀疏。
参试菌株平均生长速率和菌落直径差异显著。C10号菌株具有最快的菌丝生长速率和最大的菌落直径,分别为0.81 cm·d-1和8.25 cm,其中菌落直径显著大于其他菌株。其次为C2号菌株,菌丝生长速度和菌落直径分别为0.78 cm·d-1和7.25 cm。C16号菌株菌丝生长速率最慢,菌落直径最小。综合菌丝颜色、密度、均匀度及生长速率和菌落直径可以看出,菌丝生长速率最快的C10、C2、C6号菌种,其菌丝也最浓密,菌丝洁白均匀。菌株菌丝生长速率和菌丝密度在母种培养基上并不完全一致,比如C5号菌丝浓密洁白,但生长速率较慢,为0.53 cm·d-1;C11号菌株生长速率较快,为0.62 cm·d-1,但是菌丝稀疏。