不同温度、盐度条件对三种小丑鱼 仔鱼发育和变态的影响

摘要：为了解温度和盐度对眼斑双锯鱼（Amphiprion ocellaris）、黑公子小丑（Amphiprion ocellaris black）和海葵双锯鱼（毕加索小丑，Amphiprion percula）仔鱼变态和发育的影响，在不同温度（22、26、30、34 ℃）和不同盐度（20‰、25‰、30‰、35‰）下，研究三种小丑鱼仔鱼的成活率和变态时间，及初孵仔鱼在水温28 ℃、盐度30‰条件下，12 d内体长的增长情况。结果表明，三种小丑鱼仔鱼的存活率随温度的升高呈现先升高后下降的趋势，变态时间随温度升高呈现缩短的趋势，其中30 ℃时，眼斑双锯鱼和黑公子小丑仔鱼的存活率最高，26 ℃时，毕加索小丑仔鱼的存活率最高;三种小丑鱼仔鱼的成活率和变态时间随盐度的升高整体呈现先上升后下降的趋势，在盐度30‰时，三种小丑鱼仔鱼的成活率最高;在水温（28±1） ℃、盐度30‰条件下，初孵仔鱼体长大小依次为黑公子小丑、眼斑双锯鱼、毕加索小丑。培养12 d后，三种小丑鱼体长增幅大小依次为毕加索小丑、眼斑双锯鱼、黑公子小丑。分析认为，三种小丑鱼在水温25～30 ℃，盐度30 ‰时进行仔鱼培育最为适宜。

关键词：小丑鱼;仔稚鱼;温度;盐度;发育;存活率

中图分类号：S 917.4

随着我国经济的发展和人民生活水平的提高，人们对精神文化需求越来越迫切，海水观赏鱼作为一种大众休闲观赏鱼类，越来越受到人们的关注和喜爱，市场需求量日益增加[1]。其中小丑鱼就是一类具有较高观赏价值的海水观赏鱼，因其色彩艳丽、性情温和，且易于饲养，受到市场的追捧。小丑鱼又称海葵鱼，为鲈形目，雀鲷科，海葵鱼亚科鱼类，共有2个属，分别为双锯鱼属 （Amphiprion）和棘颊雀鲷属（Premna），其中双锯鱼属共29种，棘颊雀鲷属仅1种[2]。目前，有关小丑鱼的繁殖生物学研究较多，但主要集中在小丑鱼的性转化方面[3-6]和眼斑双锯鱼（Amphiprion ocellaris）、白条双锯鱼（Amphiprion frenatus）、棘颊雀鲷（Premnas biaculeatus）等品种的繁殖技术方面[1， 7-11]，然而作为目前市面上最受欢迎的眼斑双锯鱼、黑公子小丑（Amphiprion ocellaris black）和海葵双锯鱼（毕加索小丑，Amphiprion percula），有关环境因子对它们仔鱼生长发育的影响研究却鲜有报道，因此本试验通过设置不同水温和不同盐度的培育条件，研究探讨了眼斑双锯鱼、黑公子小丑和毕加索小丑仔鱼存活率和发育的情况，得出三种小丑鱼仔鱼期的最适培育条件，并摸清了三种小丑鱼仔鱼的变态发育规律。本研究不仅可以提高三种小丑鱼繁养殖过程中仔鱼的存活率，增加繁养殖产量、提高养殖效益，而且对小丑鱼的生理生态学研究具有重要的科学意义。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1水源各盐度梯度海水由盐度120‰的卤水添加淡水配置而成。盐度120‰的卤水经30 mg/L的漂白粉消毒24 h后，再经12 h的蛋白质分离器处理后使用。淡水源自地下800 m的井水。

1.1.2试验仔鱼试验于2019年7—9月在唐山市丰南区唐山拓海生物科技有限公司生产场地进行。试验选用4号亲鱼养殖系统中一对眼斑双锯鱼亲鱼、一对黑公子小丑亲鱼和一对毕加索小丑亲鱼。该系列亲鱼于2016年7月在广州花地湾花鸟鱼虫批发市场购得，经过驯养、人工配对、促熟，于2017年3月开始产卵。试验所用初孵仔鱼为眼斑双锯鱼亲鱼、黑公子小丑亲鱼和毕加索小丑亲鱼连续4批卵初孵的仔鱼，挑选其中健康活力好的仔鱼进行试验。

1.1.3亲鱼培育由3层玻璃缸组成，最低一层底缸，上面两层亲鱼缸。底缸2.4 m×0.5 m×06 m，亲鱼缸2.4 m×0.4 m×0.6 m。亲鱼缸中间用透明亚克力板隔开，分成0.4 m×0.4 m×04 m的隔间，每个隔间放一个花盆和一对亲鱼，两层亲鱼缸上距水面20 cm处，放置LED 灯，光照强度在4 000 lx左右。底缸分成4格：上水格、藻缸格、生化滤材格、下水格，上水水泵8 000 L/h，下水口套纤维过滤袋，生化滤材格由珊瑚骨、陶瓷环和细菌屋组成，藻缸格养殖葡萄球藻和羽毛藻，每天19：00至次日7：00开藻缸灯。水温（27±0.5） ℃，盐度30‰，pH值 8.4，24 h保持水循环。投喂自制亲鱼饲料，每天投喂2次，分别在上午10：00和下午15：00，每天下午喂完后，吸底补水。

1.2试验设计

1.2.1不同盐度对三种小丑鱼仔鱼变态和发育的影响试验设20‰、25‰、30‰、35‰共4个盐度梯度，每种小丑鱼同一批次孵化的仔鱼完成1个盐度梯度的试验。每组设3个重复。从每种小丑鱼初孵仔鱼中挑出150尾，平均置于3个30 L的玻璃缸中，三种小丑鱼，共使用9个30 L的玻璃缸。

培育初期微充气，随着个体的生长气量逐渐增大，仔鱼期不换水只加水，随着个体的生长，换水量从20%增加到80%，培育水温26 ℃，塑料桶上方20 cm处，悬挂LED灯，光强2 000 lx。试验仔鱼的开口饵料为L型褶皱臂尾轮虫，投喂前用小球藻强化，在孵化后第4～5 d时，开始配合投喂卤虫无节幼体。每天早晨、中午和下午查看桶底部有无死鱼，并及时吸出来，当80%以上的仔鱼开始出现第一条白色头纹时（变态时间以鱼头部出现第一条白色头纹为标志），记录距离孵化时间。试验从2019年7月10日至9月8日，总计60 d。

1.2.2不同温度对三种小丑鱼仔鱼变态和发育的影响试验设22、26、30、34 ℃共4个温度梯度，每种小丑鱼同一批次孵化的仔鱼完成1个温度梯度的试验。每组设3个重复。从每种小丑鱼初孵仔鱼中挑出150尾，平均置于3个30 L的玻璃缸中，三种小丑鱼，共使用9个30 L的玻璃缸。

初孵仔鱼管理方法同1.2.1。试验从2019年7月10日至9月8日，总计60 d。

1.2.3三种小丑鱼仔鱼到稚鱼的生长比较试验从每种小丑鱼初孵仔鱼中挑出150尾，平均置于3个30 L的玻璃缸中，三种小丑鱼，共使用9个30 L的玻璃缸。每4 d从各玻璃缸内分别取样8尾小丑鱼进行全长和体重测定，试验周期12 d。

1.3数据分析

计算公式如下：

存活率（%）=Nt/N0×100% ，

式中：Nt为最终存活数;N0为起始尾数。

采用Excel软件和SPSS13.0软件对试验数据进行统计学分析，先对数据作单因素方差分析（ANOVA），组间若有显著差异，再作Duncan's多重比较，P<0.05表示差异显著。

2试验结果

2.1不同温度对三种小丑鱼仔鱼发育和变态的影响

不同温度对眼斑双锯鱼、黑公子小丑和毕加索小丑仔鱼变态时间和成活率的影响，分别见图1和图2。

从图1可以看出，温度对三种小丑鱼仔鱼变态时间的影响较大，且三种小丑鱼仔鱼变态时间与温度的变化呈现负相关，随着温度的升高，三种小丑鱼仔鱼的变态时间逐渐缩短。试验结果显示，眼斑双锯鱼仔鱼在22 ℃时，变态时间最长，为（15.33±0.68）d，在34 ℃时，变态时间最短，为（8.25±0.55） d，缩短了46.18%，且各组变态时间差异显著（P<0.05）;黑公子小丑鱼仔鱼在22 ℃时无成活率，在26 ℃时仔鱼的变态时间最长，为（11.54±0.68）d，在34 ℃时，变态时间最短，为（8.43±0.52） d，缩短了26.95%，且各组变态时间差异显著（P<005）;毕加索小丑鱼仔鱼在22 ℃时，变态时间最长，为（16.29±0.77） d，在34 ℃时无成活率，30 ℃时变态时间最短，为（11.52±0.72） d，缩短了29.28%，且各组变态时间差异显著（P<0.05）。

从图2可以看出，三种小丑鱼仔鱼的存活率，随着温度的增加整体呈现先增加后下降的趋势。眼斑双锯鱼仔鱼在22～30 ℃时，随着温度的升高存活率逐渐增高，在30 ℃时存活率最高，为（5011±5.11）%，到34 ℃时达到最低，为（12.33±3.81）%，降幅为75.39%，除26 ℃和30 ℃之间的成活率差异不显著（P>0.05），其余各组成活率差异极显著（P<0.01）;黑公子小丑鱼仔鱼在22 ℃时存活率为0，在26～30 ℃时，存活率随着温度的升高而增高，在30 ℃时存活率最高，为（59.15±4.73）%，之后34℃时存活率下降至（32.25±4.39）%，降幅达到45.48%，且各组成活率差异显著（P<0.05）;毕加索小丑鱼仔鱼在34 ℃时存活率为0，在22～30 ℃时，随着温度的升高先增高后降低，在22 ℃时存活率最低，为（18.52±3.72）%，在26 ℃时，存活率达到最高，为（48.79±4.88）%，增幅度达到163.44%，且各组成活率差异显著（P<0.05）。

2.2不同盐度对三种小丑鱼仔鱼发育和变态的影响

不同盐度对眼斑双锯鱼、黑公子小丑和毕加索小丑仔鱼变态时间和成活率的影响，分别见图3和图4。

从图3可以看出，与温度相比较，盐度对三种小丑鱼仔鱼变态时间的影响较小。三种小丑鱼仔鱼变态时间与盐度的变化呈现负相关，随着盐度的升高，三种小丑鱼仔鱼的变态时间逐渐缩短。试验结果显示，眼斑双锯鱼仔鱼在盐度20‰时，变态时间最长，为（11.23±0.55）d，在盐度30‰时，变态时间最短，为（10.11±0.82） d，缩短997%，且各组变态时间差异显著（P<0.05）;黑公子小丑鱼仔鱼在盐度20‰时，变态时间最长，为（12.34±0.62）d，在盐度30‰时，变态时间最短，为（11.25±0.66） d，缩短8.83%，且各组变态时间差异显著（P<005）;毕加索小丑鱼仔鱼在盐度35‰时，变态时间最长，为（12.38±0.55）d，在盐度30‰时，变态时间最短，为（12.17±0.39）d，缩短1.7%，且各组变态时间差异显著（P<005）。三种小丑鱼在盐度30‰和35‰时，变态时间相近，盐度对三种小丑鱼的变态时间影响较小。

从图4可以看出，三种小丑鱼仔鱼的存活率，随着盐度的增加整体呈现先增加后下降的趋势。眼斑双锯鱼仔鱼在盐度20‰～30‰时，随着盐度的升高存活率逐渐增高，在盐度30‰时存活率最高，为（49.38±5.17）%，上升了23.45%，随后存活率下降，在盐度35‰时为（45.52±6.28）%，降低7.82%;黑公子小丑鱼在盐度20‰～30‰时，随着盐度的升高存活率逐渐增高，在盐度30‰时存活率最高，为（55.29±4.88）%，上升19.21%，随后存活率下降，在盐度35‰时为（48.35±551）%，降低12.55%;毕加索小丑鱼在盐度20‰～30‰时，随着盐度的升高存活率逐渐增高，在盐度30‰时存活率最高，为（47.78±6.79）%，上升21.64%，随后存活率下降，在盐度35‰时为（42.29±4.99）%，降低11.49%。

2.3三种小丑鱼仔鱼到稚鱼生长情况的比较

从图5可以看出，随着时间的增长，三种小丑鱼的体长逐渐增加。眼斑双锯鱼在12 d时，体长增长75.84%，8～12 d时，体长增长速度最快，增长1.22 cm;黑公子小丑鱼在12 d时，体长增长39.84%，初孵～4 d时，体长增长速度最快，增长0.75 cm;毕加索小丑鱼在12 d时，体长增长862%，8～12 d时，体长增长速度最快，增长117 cm。

3讨论

3.1温度对三种小丑鱼仔鱼发育和变态的影响

温度是影响海水鱼类生存和生长的重要因素之一[8]，温度过高或过低都不利于鱼类的生长发育，因此选择适合的培育水温对繁养殖海水鱼至关重要。自然海域中小丑鱼生活在珊瑚礁区域中，温度对小丑鱼仔稚鱼生长、发育和繁殖都有着直接的影响[12]，有研究表明，温度会影响稚鱼的新陈代谢导致生理机能（如生长发育和行为方式）受到影响[13]。本试验中，三种小丑鱼仔鱼的存活率都呈现先升高后降低的现象，其中眼斑双锯鱼在各温度条件下都能成活，而黑公子小丑和毕加索小丑分别在22 ℃和34 ℃时无法存活，由此推测眼斑双锯鱼仔鱼对温度的耐受性强于黑公子小丑和毕加索小丑鱼的仔鱼。同时，试验结果表明眼斑双锯鱼和黑公子小丑仔鱼30 ℃时成活率最高，而毕加索小丑仔鱼26 ℃时成活率最高，且黑公子小丑的仔鱼存活率明显高于眼斑双锯鱼和毕加索小丑，推测可能是由于黑公子小丑初孵仔鱼个头较大，体质较强，导致它的成活率显著高于其他两个品种。李泽滨等[12]在研究眼斑双锯鱼的幼鱼时发现水温在17～32 ℃之间，眼斑双锯鱼幼鱼的成活率基本不受影响，且成活率都高于90%，由此可以推测小丑鱼在仔稚鱼期间，对温度较为敏感，当进入幼鱼期时，随着个头的增长和体重的增加抵抗外界的逆境能力增强，所以在小丑鱼繁养殖期间，尤其注意在仔稚鱼培育期间尽量避免温度波动，且水温需维持在26～30 ℃。