金刺梨叶部病害发生规律调查及病原鉴定

摘要  ［目的］明确金刺梨叶部病害的发生规律和主要病原菌种类。［方法］于2021年6、7、10月对安顺市普定山地金刺梨产业示范园金刺梨2种主要叶片病害黑斑病和白粉病进行调查，并采用组织分离法和科赫法则检测叶片黑斑病病原菌。［结果］6、7月金刺梨叶片的黑斑病和白粉病病株率分别为68.00%、68.00%和40.00%、62.00%，而10月黑斑病病株率则高达94.00%，白粉病病株率为0，病情指数分别为0.022 8±0.014 3、0.041 0±0.039 4、0.166 4±0.094 7和0.068 0±0.136 0、0.077 0±0.111 5、0.000 2±0.000 4。通过分离得到叶片黑斑病病原菌共2株，经过形态学与分子生物学鉴定，分别为紫荆间座壳菌（Diaporthe cercidis.）和粉红单端孢菌（Trichothecium roseum）。金刺梨2种主要叶部病害的发生率和病情指数随着季节变化而变化，其中10月黑斑病病害的发生最为严重，白粉病未见发病。［结论］报道了金刺梨叶片黑斑病的病原菌种类，为其病害防治提供了科学依据和参考。

关键词  金刺梨；叶部病害；紫荆间座壳菌；粉红单端孢菌；发生规律；病原分离

中图分类号  S436.612.1+4  文献标识码  A  文章编号  0517-6611（2024）05-0147-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.05.036

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Investigation and Pathogen Identification of Leaf Diseases of Rosa sterilis

ZHANG Xing-yue，LIU Tian-lei，CONG Chun-lei et al

（Agricultural College，Anshun University/Key Laboratory of High Efficiency Agricultural Plant Protection Informatization in Central Guizhou，Anshun，Guizhou 561000）

Abstract  ［Objective］To determine the occurrence regularity and primary pathogen species of leaf diseases in Rosa sterilis S.D.Shi.［Method］This study investigated two main leaf diseases，black spot，and powdery mildew，at the industrial demonstration park of Rosa sterilis S.D.Shi  in Puding Mountain，Anshun City，in June，July，and October 2021. The pathogen of leaf black spot was detected using the tissue separation method and Koch’s rule.［Result］The results showed that the diseased plant rates of black spot and powdery mildew were 68.00% and 68.00%，40.00%，and 62.00%，respectively，in June and July. In October，the rate of black spot disease was as high as 94.00%，while the incidence of powdery mildew was 0. The disease index was 0.022 8±0.014 3，0.041 0±0.039 4，0.166 4±0.094 7，and 0.068 0±0.136 0，0.077 0±0.111 5，0.000 2±0.000 4，respectively. Two strains of leaf black spot pathogens were isolated. Through morphology and molecular biology identification，they were identified as Diaporthe cercidis and Trichothecium roseum，respectively. The incidence and disease index of the two main leaf diseases of Rosa sterilis S.D.Shi varied with seasons. The occurrence of black spot disease was most severe in October，with no incidence of powdery mildew.［Conclusion］The pathogen species of leaf black spot in Rosa sterilis S.D.Shi were reported，providing a scientific basis and reference for disease control.

Key words  Rosa sterills;Leaf diseases;Diaporthe cercidis;Trichothecium roseum;Occurrence regularities;Isolation and identification

基金项目  贵州省科学技术基金资助项目（黔科合基础〔2017〕1001）；贵州省教育厅自然科学研究资助项目（黔教技〔2022〕052号）;安顺市科技计划资助项目（安市科农〔2018〕18号）;安顺学院基金资助项目（Asxyxkpt201902）;贵州省大学生创新创业项目（202110667007）。

作者简介  张兴跃（1999—），男，贵州兴义人，从事植物保护研究。*通信作者，讲师，从事果树病虫害综合治理研究。

收稿日期  2023-05-09

金刺梨（Rosa sterills S.D.Shi）又名无籽刺梨、搭钩刺梨，属蔷薇科蔷薇属多年生落叶攀缘性灌木［1］。1983年首次发表［2］，与刺梨是近源种。后经过人工引种开始大面积种植，贵州境内主要分布在兴仁、安顺、贵阳、毕节。金刺梨作为第三代特色水果之一，果实含有丰富的VC和黄酮类物质，具有抗氧化、抗衰老、降血糖等功效，具有广阔的市场开发前景［3］。

近年来，金刺梨随着面积的增加病虫害也逐渐加重，但有关其病害的相关研究较少。钟漫等［4］对安顺无籽刺梨白粉病和褐斑病进行了防治试验，发现哈茨木霉菌抑制剂和波尔多液均能有效抑制2种病害的发展，用2 250 g/hm2哈茨木霉菌抑制剂防治白粉病，用1∶2∶200波尔多液防治褐斑病可提高无籽刺梨的健康程度和产量。张秀伟等［5］报道了开花期危害金刺梨幼嫩果梗的黑斑病，并对病原菌进行了分离，鉴定了导致该病害的真菌病原菌Phomopsis capsici，并探讨了该菌的生物学特性，发现该菌最适宜在28  ℃、pH 4，果糖和蛋白胨为碳氮源及连续光照的条件下生长，其菌丝和孢子的致死温度分别为55和50  ℃。张秀伟等［6］还筛选出80%多菌灵可湿性粉剂为最佳防治药剂，为金刺梨黑斑病的有效防控提供了科学依据。Shi等［7］分离鉴定了导致金刺梨果实采后腐烂的主要真菌Neopestalotiopsis clavispora。

叶片黑斑病、白粉病在与金刺梨同属的蔷薇植物中发生也非常严重。如月季黑斑病，病原菌主要为蔷薇盘二孢（Diplocarpon rosae）［8］和链格孢属（Alternaria spp.）［9］真菌。其中，蔷薇盘二孢专性寄生蔷薇属植物，是一种难培养菌［10-11］，该病能对月季、玫瑰的叶片、叶柄、嫩枝及花梗和花造成危害，使植株生长不良，严重时致使大量叶片脱落，枝条光秃，初发病时出现褐色小点，后变为紫褐色至黑褐色，病斑边缘呈现放射状，后期会产生黑色疱状凸起即分生孢子梗［12］。而另一种则是被鉴定到最多的链格孢（Alternaria alternata）［13］，如陈雪莉［14］鉴定出月季黑斑病病原菌为链格孢菌，在发病初期同样出现褐色小点，后期病斑会产生少量黑色颗粒，直到叶片全部脱落至植株死亡，对月季的危害严重。其次是白粉病，在蔷薇属的月季或玫瑰上引起病症的病原菌是蔷薇单丝壳菌和毡毛单囊壳菌［15］，该病菌主要通过感染叶片、花蕾、嫩枝等致病，感病严重的植株会出现枝条扭曲、叶片皱缩及花蕾畸形等，可造成大量的经济损失［16-17］。有研究表明，危害金刺梨的白粉病病原菌属于蔷薇白粉病病原中的毡毛单囊菌［18］，同样也严重危害着金刺梨。

由于对金刺梨病虫害的研究起步较晚，对其病害的相关研究较少。而病虫害是金刺梨生产过程中重要的限制因素，掌握病虫害的发生规律及特点是进行有效防控的前提。近年来笔者通过对刺梨园调查发现，在金刺梨上出现了与月季黑斑病发病症状类似的病害以及白粉病病情。笔者以安顺普定县金刺梨种植基地为试验区展开病害调查，明确叶片黑斑病及白粉病的危害程度，并对金刺梨叶片黑斑病进行病原分离，明确主要病原菌种类，旨在为病害防治提供科学依据。

1  材料与方法

1.1  调查地概况

安顺市普定县马官镇（偏杨村牛干坝）山地金刺梨产业示范园（105.78°E，26.20°N，海拔1 398 m），种植面积66.67余hm2，果园处于丰果盛产期。

1.2  病害调查方法

以金刺梨种植基地为试验区进行调查。通过在金刺梨园内行走观察，记录病害发生种类及严重程度，同时采集具有明显病症的枝条、果实、叶片等样本，对采集样本记录，并带回实验室进行病症描述，并进行病原菌的分离。

1.3  病株率及病情指数计算

针对危害较严重的叶片黑斑病、白粉病按照五点取样法进行取样调查。每个样点选取5株金刺梨，每株按东、南、西、北、中5个方位，每个方位采集10片叶片。针对不同病害，参考月季黑斑病和白粉病的分级标准，计算病情指数。每个点选取10株，记录感病株数，明确其发病程度，计算病株率。黑斑病、白粉病分级标准［4，19］：

0级，植株健康生长，叶片上没有病斑；1级，植株叶片上有极少病斑，病斑较小，病斑面积占总叶面积的25%以下；2级，植株叶片上有少量病斑，叶上病斑小，病斑面积占总叶面积的25%～50%；3级，植株叶片上有较多病斑，叶上病斑大，病斑面积占总叶面积的50%～75%；4级，植株上有很多病斑，叶上病斑较大，病斑面积占总叶面积的75%以上。

病情指数的计算［20］：

病情指数=（各级发病叶片数×各级别的代表值）调查叶片总数×最高级别代表值）×100%

病株率的计算：

病株率=感病株数/调查总株数×100%

1.4  病原菌分离与鉴定

采用组织分离法，对有病状的叶片及果实进行病原菌分离与纯化。在病组织与健康组织的交界处剪下2～3 mm大小的组织块，先用75%乙醇消毒2～3 s，后用5%次氯酸钠溶液消毒1 min，无菌水清洗3次，用无菌滤纸吸干，接到PDA培养基上，置于27.3  ℃恒温箱中无光培养，待边缘长出菌丝后，挑取最边上的菌丝进行纯化，重复2～3次直至获得纯培养。对病原菌进行镜检记录菌丝及分生孢子形态，参考《植物病原真菌属分类图索》［21］等进行鉴定。