不同光照强度对一种新紫菜孢子体的光合色素和叶绿素荧光参数的影响

摘要  将新紫菜孢子体放置在5种不同的光照强度下［10、20、40、80、160 μmol/（m2 ·s）］培养，测量叶绿素a（Chl a）、类胡萝卜素（Car）、藻红蛋白（PE）、最大光合效率（Fv/Fm）和最大相对电子传递速率（rETRmax），探讨光照强度对新紫菜孢子体的光合色素含量和叶绿素荧光参数的影响。结果表明，20 μmol/（m2 ·s）培养下的新紫菜光合色素（Chl a、Car和PE）含量在培养期间都呈现出一个较高的数值，培养30 d后的新紫菜孢子体的Fv/Fm呈现出较高值。80和160 μmol/（m2 ·s）处理下培养至15 d 时其叶绿素荧光参数（Fv/Fm和rETRmax）呈现出较高的数值，培养至30 d时其光合色素含量和叶绿素荧光参数均呈现出一个低值。20 μmol/（m2 ·s）条件培养下的新紫菜孢子体色泽呈现健康的紫红色，高光［80、160 μmol/（m2 ·s）］培养下的新紫菜孢子体色泽变淡，发黄。根据其光合色素含量和叶绿素荧光参数来看，新紫菜孢子体最适培养光照强度应该在20 μmol/（m2 ·s）。

关键词  新紫菜；光照强度；光合色素；叶绿素荧光参数

中图分类号  S968.3+1   文献标识码  A  文章编号  0517-6611（2024）07-0001-04

doi： 10.3969/j.issn.0517-6611.2024.07.001

Effects of Different Light Intensity on Photosynthetic Pigment and Chlorophyll Fluorescence Parameters of Neoporphyra sp.Sporophyte

WANG Nan，SU Ni，GU Quan et al

（Key Laboratory of Marine Biotechnology，College of Marine Science and Fisheries，Jiangsu Ocean University，Lianyungang，Jiangsu 222005）

Abstract  The sporophytes of Neoporphyra  sp. were placed in 5 different light intensities，respectively 10，20，40，80 and 160 μmol/（m2 ·s），respectively.Chlorophyll a （Chl a），carotenoids （Car），phycoerythrin （PE），maximum photosynthetic efficiency （Fv/Fm） and maximum relative electron transfer rate （rETRmax） were measured，the effects of light intensity on photosynthetic pigment content and chlorophyll fluorescence parameters of Neoporphyra sp.sporophyte were explored.The result showed that the photosynthetic pigment contents （Chl a，Car，and PE） of N.sp.sporophyte by 20 μmol/（m2 ·s） were relatively high during the cultivation period，and the Fv/Fm of Neoporphyra sp.sporophyte after 30 days of cultivation showed a high value.The chlorophyll fluorescence parameters （Fv/Fm and rETRmax） showed high values after cultured at 80 and 160 μmol/（m2 ·s） for 15 days，while the photosynthetic pigment content and chlorophyll fluorescence parameters showed low values after 30 days of culture.The sporophytes of Neoporphyra sp.were healthy purplish red in 20 μmol/（m2 ·s） cultures，while the sporophytes of Neoporphyra sp.were light and yellow in high light cultures［80 and 160 μmol/（m2 ·s）］.According to the photosynthetic pigment content and chlorophyll fluorescence parameters，the optimal light intensity of Neoporphyra sp.spores was 20 μmol/（m2 ·s）.

Key words  Neoporphyra sp.;Light intensity;Photosynthetic pigment;Chlorophyll fluorescence parameter

我国作为农业大国，紫菜是我国出口的重要海洋农作品中不可或缺的一部分，是食物的来源之一，同时也是我国沿海城市重要的经济来源［1-2］。紫菜蕴含的营养物质的含量相对也比较高，物美价廉［3］。紫菜还能有效改善海洋环境的富营养化问题，增加溶解氧含量，调控海水环境，防治海洋酸化问题以及海洋低溶氧问题等［4］。紫菜富含人体所需的多种物质，长期食用能够促进人体健康、提高人体防御抵抗能力等功效［5］。在连云港的海域地区调查中发现了一种紫菜，经过初步研究，这种紫菜只在Genebank有少量记录，没有正式命名。该种紫菜的孢子体具有形态细长、藻体较薄、耐干出等特点，具有潜在的栽培价值和生态价值。

光是植物生长发育的一部分，也是光合作用过程中不可缺乏的一部分，能够促进植物体的新陈代谢，促进植物体细胞分化以及细胞分裂，是植物体不可缺少的外界条件［6］。生长在潮间带的大型藻类紫菜在其培养过程中必须应对潮间带环境因素的巨大变化，其中包括光照强度这一重要环境因 素。关于其他大型藻类的研究中，很多藻类的生长与其光合活性密切相关，例如螺旋藻。由于相对较高的光合生理活性可以加速藻体的生长，因此研究藻体的光合生理特性对藻种的选育具有重要意义［7］。从育种的角度来看，培育具有高光利用效率的品种也是至关重要的。在光照试验中，试验人员更多是使用人工光源培育植物体的生长发育，该试验采用LED光源为紫菜生长提供培养光强［8］。为了更好地培育该种新紫菜，笔者研究新紫菜在不同时期下不同光照强度下叶绿素荧光特性、光合色素含量，探讨其对不同光照强度的响应，找到其最适合的培养光照强度。

1 材料与方法

1.1 试验材料    试验材料为实验室培养的新紫菜孢子体，在实验室将孢子体在无菌海水内通空气培养3 d即开始试验，采用VSE灭菌天然海水培养基。

1.2 试验条件设置

HP1000G-D型植物培养箱内设置5种不同的光照强度，分别为10、20、40、80和160 μmol/（m2 ·s）。 将新紫菜的孢子体放入500 mL培养瓶中，每个光照强度条件下设置3个平行试验，温度20 ℃，光周期为12 h/12 h。

1.3 试验方法

1.3.1    叶绿素a（Chl a）和类胡萝卜素（Car）的测定。

新紫菜孢子体培养至15和30 d后，称取0.1 g左右的孢子体放入含有5 mL甲醇的离心管中，避光处理。放置4 ℃的冰箱冷藏24 h后，4 ℃、5 000 r/min离心10 min。吸取上清液3 mL，测量其在470、653、666 nm波长处的吸光度。Car和Chl a的计算公式如下：

Car=（1 000×A470+1 403.57×A666-3 473.87×A653）/221

Chl a=15.65×A666-7.53×A653

其中，A470、A653和A666代表在对应波长下的吸光度。

1.3.2    藻红蛋白（PE）的测定。

新紫菜孢子体培养至15和30 d后，称取0.1 g左右的孢子体与石英砂、磷酸缓冲液（pH=6.8）研磨碎。用磷酸缓冲液将其定容至15 mL，4 ℃、5 000 r/min离心15 min。吸取3 mL上清液，测量其在455、564、592、618、645 nm波长处的吸光度。PE和PC的计算公式如下：

PE=［（A564-A592）-（A455-A592）×0.2］×0.12

其中，A455、A564、A592代表对应波长下的吸光度。

1.3.3    叶绿素荧光参数的测定。

新紫菜孢子体培养至15和30 d后，取5种不同光照强度下等量新紫菜的孢子体放置于比色皿中，暗处理15 min，然后用手持便携式叶绿素荧光测定仪测量最大光合效率（Fv/Fm）、相对电子传递速率（rETR）。

2 结果与分析

2.1 不同光照强度处理下新紫菜孢子体叶绿素a和类胡萝卜素含量

从图1A可以看出，不同光照强度下培养15 d的新紫菜孢子体的叶绿素a含量在20 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最大值（281.35 μg/g），之后开始随着光照强度的增加逐渐降低。20 μmol/（m2 ·s）条件下的叶绿素a显著高于其他光照强度处理组， 在160 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最低值（173.11 μg/g）。在20 μmol/（m2 ·s）条件下，类胡萝卜素含量达到了最大值（53.36 μg/g），之后开始随着光照强度的增加逐渐降低 ，在160 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最低值（27.07 μg/g）。

从图1B可以看出，不同光照强度下培养30 d的新紫菜孢子体的叶绿素a含量在10和20 μmol/（m2 ·s）光照强度条件下无显著差异（P＞0.05）；在20 μmol/（m2 ·s）光照强度条件下达到了最大值（527.09 μg/g），之后开始随着光照强度的增加逐渐降低，在160 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最低值（249.95 μg/g）。新紫菜孢子体的类胡萝卜素含量变化的趋势与新紫菜孢子体的叶绿素a含量趋势相同。在20 μmol/（m2 ·s）条件下含量达到了最大值（77.74  μg/g），之后随着光照强度的增加而降低，在80 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最低值（30.00 μg/g）。

2.2 不同光照强度处理下新紫菜孢子体藻红蛋白含量

从图2可以看出，不同光照强度下培养15 d的新紫菜孢子体藻红蛋白含量随着光照强度的增加而升高并在20 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最大值（3 754.48 μg/g），之后随着光照强度的增加逐渐降低。10、20和40 μmol/（m2 ·s）条件下的藻红蛋白含量显著高于80和160 μmol/（m2 ·s）条件下的藻红蛋白含量，在160 μmol/（m2 ·s）条件下达到了最低值（1 363.12 μg/g）。