不同人工栽培方式对灵芝生长状况的影响

摘要 以灵芝品种G10为试验材料，通过设置代料栽培和椴木栽培这2种人工栽培方式，分析常用的不同人工栽培方式对灵芝生长状况，以及采摘后灵芝子实体多糖、三萜化合物含量的影响，比较得出实验室条件下，生长状况更好、营养价值更高的灵芝栽培方式，以期为灵芝种植产业和消费者选购灵芝提供一定的理论依据。结果表明，代料栽培灵芝菌丝洁白绵密、生长速度较快；子实体生长周期较短；采摘后子实体多糖含量为1.12%，三萜化合物含量为1.05%。椴木栽培灵芝菌丝疏松发黄，生长速度较慢；子实体生长周期较长；采摘后子实体多糖含量为0.99%，三萜化合物含量为0.98%。不同栽培方式对灵芝生长状况及采后子实体多糖、三萜化合物的含量有较为显著的影响，且优良的代料配方栽培优于椴木栽培。

关键词 灵芝；栽培方式；药用真菌；成分测定

中图分类号 S567.3+1 文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2023）06-0031-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.06.010

Effects of Cultivation Methods on Growth Conditions of Ganoderma lucidum

LI Jia，CHEN Tian－ran，DENG Zi－feng et al

（College of Bioscience and Food Engineering， Shaanxi Xueqian Normal University， Xi’an，Shaanxi 710100）

Abstract In this study， Ganoderma lucidum ‘G10’ was used as the experimental material.By setting two artificial cultivation methods： substitute cultivation and basswood cultivation， the effects of different artificial cultivation methods on the growth status of Ganoderma lucidum and the content of polysaccharides and triterpenes in Ganoderma lucidum fruiting body after picking were explored and analyzed.The cultivation method of Ganoderma lucidum with better growth status and higher nutritional value under laboratory conditions was compared， in order to provide some theoretical basis for Ganoderma lucidum planting industry and consumers buying Ganoderma lucidum.The results showed that the mycelium of Ganoderma lucidum cultivated with substitute was white and dense， and the growth rate was fast;the growth cycle of fruiting body was short;the content of polysaccharides and triterpenoids in fruiting bodies were 1.12% and 1.05%.The hyphae of Ganoderma lucidum cultivated in basswood were loose and yellow， and the growth rate was slow;the growth cycle of fruiting body was long;the content of polysaccharides and triterpenoids in fruit bodies were 0.99% and 0.98%.Different cultivation methods had significant effects on the growth of Ganoderma lucidum and the content of polysaccharides and triterpenoids in postharvest fruiting bodies， and the excellent substitute formula cultivation was better than basswood cultivation.

Key words Ganoderma lucidum;Cultivation method;Medical fungi;Composition determination

灵芝（Ganoderma lucidum）是一种珍贵的食药用真菌，有“仙草”“林中灵”的美称［1］，属于真菌界担子菌门伞菌纲多孔菌目灵芝科灵芝属［2］。在我国灵芝已经有2 000多年的历史［3］，早在《神农本草经》中，对灵芝的药用功效就有了较为详细的记载［4］。中医认为灵芝入药有清热解毒、益肾保肝、滋补强身、扶正固本、美容养颜、安神益精气等功效［5］。现代医学研究表明，灵芝的天然成分中含有灵芝多糖、灵芝萜类、灵芝多酚、脂肪酸、有机锗、氨基酸等有效成分［6］，在抗肿瘤、抗心肌缺血、提高免疫、调节血脂、抗肥胖以及降低血糖改善糖尿病并发症等方面有巨大的应用潜力［7］。

我国现行的《中华人民共和国药典》2020年版第一部中收录的灵芝药材为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体［8］。由于医药科学的迅猛发展，百姓的保健意识也随之提高，灵芝作为一种传统名贵中药材而广受大众关注和喜爱，灵芝市场的需求越来越高。但一直以来，野生灵芝资源十分有限，且价格昂贵，随着科技的发展，人工栽培灵芝成为丰富灵芝资源的重要途径，能很好地扩大灵芝产量，以供市场需求。

目前，常用的灵芝人工栽培方式主要有椴木栽培和代料栽培2种。椴木栽培是指把适合于食用菌生长的原木砍伐，截成一定长度，经灭菌后进行人工接种，在适宜的环境条件下进行栽培［9］。而代料栽培是指在食用菌种植过程中利用玉米芯、秸秆、木屑等农副产品下脚料替代椴木实施栽培的一种方式。以上这2种栽培方式因投资小、原料来源广、见效快，广受农户的青睐，相同条件下这2种人工栽培方式相比较，哪种能够使灵芝长得又快又好，这对于种植者具有十分重要的现实意义。而对于消费者而言，面对市场上各种各样的灵芝，价格也千差万别，同是人工栽培灵芝，哪种栽培条件下的灵芝产品功效性成分含量更高效果更好，是否能在选购过程中有一定的理论依据作为指导，具有十分重要的意义。因此，笔者探究常见的2种不同栽培条件对灵芝生长状况及营养价值的影响，以期为灵芝种植栽培基质的选择提供一定的理论基础，同时也能对消费者选购灵芝提供一定的理论指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料 菌种为赤灵芝G10；棉籽壳、玉米芯、麦麸皮、石膏粉、椴木；聚乙烯塑料袋、塑料封口器、接种铲。

1.2 主要试剂

无水葡萄糖、齐墩果酸、甲醇、蒽酮、无水乙醇、浓硫酸、香草醛、冰醋酸、高氯酸、乙酸乙酯［10］等均为分析纯试剂，蒸馏水为实验室制备。

1.3 主要仪器

LDZX-40不锈钢立式电热蒸汽压力灭菌器（上海申安医疗器械厂），ZHJH-C115超净工作台（上海智城分析仪器制造有限公司），HH·B11·600-BS-II电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械有限公司），AD-20多功能粉碎机，TU-1901紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司），GZX-9030MBE电热鼓风干燥箱（上海博迅实业公司），FA-2004B电子天平（上海市安亭电子仪器厂）。

1.4 试验方法

1.4.1 灵芝培养基优化筛选配方。

以市场上常用的玉米芯、棉籽壳、麦麸皮为灵芝代料栽培材料［11］。通过单因素试验及正交试验确定最佳配方成分及配比为棉籽壳30%、玉米芯60%、麦皮10%、石膏1.5%［12］。综合考虑产地等因素，选择椴木段作为灵芝段木栽培培养基。

1.4.2 灵芝栽培方法。

将上述代料栽培的优化配方与椴木栽培所制作的料袋同时进行接菌、发菌管理、出芝管理等，定期进行生长状况监控与记录。

1.4.2.1 装料灭菌、接种。

将试验材料按照配方比例进行混合均匀，加水搅拌均匀，使料水比为1.0∶1.5［13］。静置2 h后，定量称量0.5 kg混料用铲子装入15 cm×30 cm×5 cm（折宽×长度×厚度）的聚丙烯封底菌种袋，用食用菌料袋封口器进行包装和封口，在121 ℃下，规范使用高压蒸汽灭菌锅下进行1 h 的湿热灭菌，静置，使料袋的温度降低到与室内温度相接近，将料袋移入超净工作台上，打开超净工作台的紫外灯照射消毒40 min后，消毒结束30 min后，进行后续的接种工作。

接种中，确保在整个接种过程中严格遵守无菌操作规程，在酒精灯对外焰旁用接种铲挖取等量适量菌块接种到料袋中。接种完成后，迅速用封口器再次封装好料袋口，转移到25 ℃培养箱中。

1.4.2.2 发菌管理。

接种后，将栽培料袋放入培养室，在25 ℃的温度下培养，确保恒温避光，环境清洁，通风良好［14］，定期对灵芝菌丝生长实况进行观察并记录菌丝长势状况、满袋时间相关指标，及时处理杂菌感染的菌袋并对其进行标记记录。

1.4.2.3 出芝管理。

当原基不断增厚凸起即需开口，用消毒后的刀片或剪刀对袋料的顶端割口出芝处理。控制培养实验室的温度为25～28 ℃，同时要保证室内的空气相对湿度为80%～90%［15］，确保灵芝的出芝过程中能够透气、通风。出芝过程中注意保持其湿度和二氧化碳浓度，保持良好的通风和环境的清洁［16］，保证不同配方管理条件一致，对灵芝每日的生长变化做相应的观察记录。出芝期间不使用任何添加剂和农药。

1.4.2.4 子实体的采收。

当菌盖不再增大、边缘增厚，菌盖边缘的颜色和中间的颜色一致，整个子实体都变成该品种应有的颜色，芝片木质化加重，上附少量孢子时即可采收。

1.4.3 灵芝生长状况记录。

1.4.3.1 灵芝的菌丝生长状况记录。

接种后将料袋放入28 ℃恒温箱中培养。分别于第3、4、5、6、7、8天测量顶端到生长圈的距离，求3次重复平均值得菌丝生长速度，同时观察菌丝密度和菌丝形态，最终记录菌丝满袋天数［17］，作为衡量菌丝生长状况的指标。

1.4.3.2 灵芝的子实体生长状况记录。

为方便记录各时期子实体生长状况，将灵芝生长过程人为划分为原基分化期、芝柄伸长期和子实体成熟期3个阶段。当菌丝长满菌袋后，菌丝逐渐密集形成菌块状，进入原基分化期；直至开口处有明显伸长，并逐渐转为黄褐色，即为芝柄伸长期；在适宜的条件下，芝柄顶端横向生长，形成似伞盖状的灵芝菌盖，伞盖下菌褶处喷射孢子粉，即为成熟期。分别记录2种栽培条件下灵芝在原基分化期、芝柄伸长期和子实体成熟期的天数，作为评估子实体生长状况的指标。

1.4.4 紫外-可见分光光度法测定灵芝多糖的含量［18］。