新疆枸杞子不同商品等级规格内涵研究

摘要 ［目的］探究新疆枸杞子不同商品等级规格与质量的内在关系。［方法］首次应用现代科学技术，以多成分含量为指标，测定不同等级规格的枸杞子中总灰分、浸出物、枸杞多糖、甜菜碱、总糖、氨基酸、蛋白质、脂肪、二氧化硫残留量等指标含量，综合评价新疆枸杞子的不同等级间质量差异。［结果］新疆枸杞子总灰分、二氧化硫残留量均超出药典标准，且与其等级高低无相关性，浸出物、总糖含量与等级呈正相关，枸杞多糖、甜菜碱、氨基酸、蛋白质、脂肪含量与等级总体呈负相关。［结论］利用质量指标的方法评价枸杞子与传统分级具有一定的相关性，以外观形状结合内在质量指标来划分枸杞子商品等级的方法更科学、可靠。

关键词 新疆枸杞子；商品等级规格；含量测定；综合评价；相关性

中图分类号 R284.1  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2023）10-0162-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.10.036

Abstract ［Objective］To explore the intrinsic relationship between different commodity grades and quality of Lycium barbarum fruit in Xinjiang.［Method］For the first time，combining modern science and technology，with multicomponent as the indicator，the contents of total ash，extract，Lycium barbarum polysaccharide （LBP），betaine，total sugar，amino acids，protein，fat and sulfur dioxide residue in Lycium barbarum fruit of different commodity grades were determined，and the quality differences between different grades of Lycium barbarum fruit in Xinjiang were comprehensively evaluated.［Result］The contents of total ash and sulfur dioxide of Lycium barbarum fruit in Xinjiang exceeded the pharmacopeia standard and were not correlated with the grades.The contents of extract and the total sugar and the grades were positively correlated，and overall，the contents of LBP，betaine，amino acids，protein and fat were negatively correlated with the grades.［Conclusion］There is a certain correlation between using quality index to evaluate Lycium barbarum fruit and traditional grading，and the method of dividing Lycium barbarum fruit commodity grades by combination of appearance and shape combined with intrinsic quality index is more scientific and reliable.

Key words Lycium barbarum fruit in Xinjiang;Commodity grades and specifications;Content determination;Comprehensive evaluation;Correlation

枸杞子为茄科枸杞属植物宁夏枸杞（Lycium barbarum L.）的干燥成熟果实，具有益精明目、滋补肝肾的功用，用于腰膝酸软、眩晕耳鸣、阳痿遗精、虚劳精亏、内热消渴、目昏不明［1-3］，主产于宁夏、青海、新疆及甘肃等地［4-10］。枸杞子作为药食两用的药材，有悠久的临床应用历史，新疆作为枸杞子主产区之一，已具备一定种植规模，产量也逐年增长，然而鲜有新疆枸杞子商品规格的研究报道。该研究通过对新疆枸杞子的枸杞多糖、甜菜碱、总糖、蛋白质及氨基酸等有效成分进行含量测定，并检测其二氧化硫残留量等安全性指标，通过对不同等级规格的新疆枸杞子进行质量综合研究，探索枸杞子不同等级规格与其质量之间的内在关系。

1 仪器与材料

1.1 仪器 戴安Ultimate 3000液相色谱仪（赛默飞世尔科技有限公司）；安捷伦1200液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；XS204型、MS603S型电子天平（瑞士梅特勒-托利多）；HWS28型电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）；DHG-9245A型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；SXL-1208马弗炉（上海精宏实验设备有限公司）；TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

1.2 材料

D-无水葡萄糖对照品（批号110833-202109，中国食品药品检定研究院，含量以99.9%计）；甜菜碱对照品（批号110894-202105，中国食品药品检定研究院，含量以98.5%计）；氨基酸对照品（批号14001，中国计量科学研究院）；异硫氰酸苯酯、三乙胺、正己烷、乙腈等均为色谱纯；甲醇、乙醚等其余试剂均为分析纯；超纯水。根据枸杞子的采收期，于2020年8月份实地采收新疆产区枸杞子，经亳州市沪谯药业郭长达高级工程师鉴定均为真品。根据《七十六种药材商品规格标准》［11］，结合GB/T 18672—2014《枸杞》［12］对枸杞子进行等级划分，详细信息及各等级性状见表1。

2 方法与结果

2.1 总灰分、浸出物含量、二氧化硫残留量的测定 参照《中国药典》2020年版［1］，分别测定新疆不同等级枸杞子总灰分、浸出物含量、二氧化硫残留量，结果见表2。从表2可以看出，浸出物符合要求，总灰分、二氧化硫残留量均超出药典标准。

2.2 枸杞多糖的含量测定

2.2.1 对照品溶液的制备。取D-无水葡萄糖对照品约25.0 mg，精密称定，置于250 mL容量瓶中，加入超纯水适量，稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 标准曲线的绘制。精密量取葡萄糖对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL分别置于具塞试管中，分别加入超纯水补至2.0 mL，再精密加入5%苯酚溶液1 mL，振荡摇匀，迅速精密加入硫酸5 mL，振荡摇匀，于试验台上静置10 min，置40 ℃恒温水浴锅中再保温15 min，取出，迅速冷却至室温（25 ℃），以相应的试剂为空白，按照UV-Vis法，在波长为490 nm处测定其吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标（X）、吸光度为纵坐标（Y）绘制标准曲线，得出回归方程为Y=16.159 47X+0.145 04（R2=0.999 5），表明葡萄糖浓度在25～125 μg/mL呈良好的线性关系。

2.2.3 含量测定。取样品粗粉约0.5 g于锥形瓶中，精密称定，加入乙醚约100 mL，于恒温水浴锅中加热回流提取1 h，静置冷却至室温，弃去乙醚液，残渣置于恒温水浴锅上挥干乙醚。再次加入80%乙醇溶液约100 mL，于恒温水浴锅中加热回流提取l h，趁热滤过，滤渣与滤器用温热的80%乙醇溶液多次洗涤，每次约30 mL，滤渣连同滤纸置于锥形瓶中，加入超纯水约150 mL，于恒温水浴锅中加热回流提取2 h。趁热滤过，用少量的热水冲洗过滤器，每次约30 mL，合并滤液与洗液，静置放冷，转移至250 mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀静置，精密移取1 mL溶液，置于具塞试管中，精密加入超纯水1.0 mL，根据“2.2.2”项下的方法，自“精密加入5%苯酚溶液1 mL”起测定其吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中葡萄糖的重量（mg），计算样品中枸杞多糖的含量，结果见表2。由表2可知，各等级枸杞子枸杞多糖含量均符合药典标准，并以特优级枸杞子枸杞多糖含量最低，乙级含量最高。

2.3 甜菜碱的含量测定

2.3.1 供试品溶液的制备。取样品粗粉约2 g于锥形瓶中，精密称定，加入80%甲醇溶液约50 mL，称定重量，超声（500 W，40 kHz）处理30 min，冷却至室温（25 ℃），再称定重量，用80%甲醇溶液补足其减失的重量，摇匀，用0.22 μm滤膜滤过，即得。

2.3.2 对照品溶液的制备。取甜菜碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度为1.0 mg/mL的对照品溶液，即得。

2.3.3 色谱条件。色谱柱为Venusil HILIC（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-10 mmol/L甲酸铵（pH 3.0）（B）85∶15；流速1.0 mL/min；柱温30  ℃；进样量10 μL；检测器为蒸发光散射检测器（ELSD）。分别精密吸取对照品溶液5、10 μL 与供试品溶液10 μL，注入液相色谱仪，分别连续进样3次，取3次平均值测定，以外标两点法对数方程计算含量，即得。

2.3.4 精密度试验。精密吸取甜菜碱对照品溶液10 μL，按“2.3.3”色谱条件连续进样6次，分别记录甜菜碱对照品的峰面积，以其峰面积计算RSD。结果发现，甜菜碱峰面积的RSD为1.4%，表明该仪器的精密度良好。

2.3.5 重复性试验。取同一批枸杞子粉末，精密称定6份，按“2.3.1”方法制备供试品溶液，按“2.3.3”色谱条件进样测定，记录甜菜碱的峰面积。结果发现，甜菜碱峰面积的RSD为1.3%，表明该方法重复性良好。

2.3.6 稳定性试验。取同一批枸杞子粉末按“2.3.1”方法制备供试品溶液，按“2.3.3”色谱条件分别于0、2、4、8、12、24 h进样检测，记录甜菜碱峰面积并计算甜菜碱含量。结果发现，甜菜碱峰面积的RSD为1.0%，表明样品溶液在24 h内基本稳定。

2.3.7 耐用性试验。

2.3.7.1 柱温的考察。取同一份样品，分别按“2.3.3”色谱条件进样分析，柱温分别设置为25、30、35  ℃，记录相应色谱图，结果显示不同柱温条件下，甜菜碱的分离度和峰形无明显变化，可见柱温的波动对该色谱条件下枸杞子甜菜碱的检测无明显影响。综合考虑，选择30  ℃作为最终的测定温度。

2.3.7.2 流速的考察。取同一份样品，分别按“2.3.3”色谱条件进样分析，流速分别设置为0.8、1.0、1.2 mL/min，记录相应色谱图，结果显示不同流速条件下，甜菜碱的分离度和峰形无明显变化，可见流速的波动对该色谱条件下枸杞子甜菜碱的检测无明显影响。综合考虑，选择1.0 mL/min作为流速。

2.3.8  加样回收率。精密称取同一批已知含量的样品粉末约1 g，分别精密加入等量的甜菜碱对照品，按“2.3.1”方法制备供试品溶液，按“2.3.3”色谱条件进样测定，计算回收率，结果见表3。从表3可以看出，平均回收率为102.4%，RSD为0.6%，表明该方法回收率良好、方法准确。

2.3.9 含量测定。按“2.3.1”方法制备各样品溶液，按“2.3.3”色谱条件进样测定甜菜碱含量（表2），其中甜菜碱对照品溶液、供试品溶液、空白对照溶液色谱图见图1。由表2可知，各等级枸杞子甜菜碱含量均符合药典标准，并以特优级枸杞子含量最低，乙级含量最高。

2.4 总糖的含量测定

2.4.1 供试品溶液的制备。取样品粗粉约2.5 g，精密称定，置于250 mL容量瓶中，加入超纯水至容积约为200 mL，置（80±2）℃恒温水浴锅中保温30 min，期间摇动多次，取出，放冷至室温，加入乙酸锌及亚铁氰化钾溶液各5 mL，摇匀，用超纯水定容至刻度，过滤，滤液备用。移取滤液50 mL于100 mL 容量瓶中，加入6 mol/L盐酸溶液10 mL，在75～80 ℃恒温水浴锅中水解15 min，取出，放冷至室温，加入甲基红指示剂1滴，用200 g/L氢氧化钠溶液中和，再用水定容至刻度，备用［12］。