宣肺止嗽合剂质量标准提高研究

摘要 [目的]建立简便测定宣肺止嗽合剂中吗啡的含量测定方法，并拟定宣肺止嗽合剂中吗啡的限度标准。[方法]采用HPLC法，使用CAPCELL PAK C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm），流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B），梯度洗脱：0～12 min，3% A→5%A;12～13 min，5% A→20%A;13～18 min，20%A;18～20 min，20% A→3% A;20～23 min，3%A;检测波长为210 nm，流速1 mL/min，柱温30 ℃，对宣肺止嗽合剂中吗啡的含量进行测定。罂粟壳及蜜炙后的罂粟壳中吗啡的含量按照《中国药典》2020年版一部中罂粟壳的含量测定方法进行测定。[结果]罂粟壳蜜制后吗啡含量较理论值高。原料药蜜罂粟壳和中成药宣肺止嗽合剂中吗啡之间的转移率为64.2%，宣肺止嗽合剂中吗啡的含量限度拟定为0.021～0.141 mg/mL。[结论]该方法快捷、准确，可对宣肺止嗽合剂质量进行控制。

关键词 宣肺止嗽合剂;罂粟壳;吗啡;含量测定;限度标准

中图分类号 R 286  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2022）18-0140-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.18.035

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Study on Improving Quality Standard of Xuanfei Zhisou Mixture

LI Cheng-ming1，WANG Rui2，ZHANG Ming-tong3 et al

（1.Department of Pharmacy， Gansu Hospital of Traditional Chinese Medicine， Lanzhou，Gansu 730050; 2.Lanzhou Institute for Food and Drug Control， Lanzhou，Gansu 730050;3.Gansu Provincial Institute of Drug Inspection，Gansu Provincial Chinese and Tibetan Medicine Inspection and Testing Technology Engineering Laboratory， National Medical Products Administration Key Laboratory of Quality Control of Chinese Medicinal Materials and Decoction Pieces，Lanzhou，Gansu 730070）

Abstract [Objective] To establish a simple method for the determination of morphine in Xuanfei Zhisou Mixture， and to establish the limit standard of morphine.[Method] The HPLC method was adopted with CAPCELLPAK C18 column （250 mm × 4.6 mm， 5 μm）.The mobile phase was acetonitrile （A） -0.1% phosphoric acid （B）， gradient elution， 0-12 min， 3% A→ 5% A; 12-13 min，5% A→20%A;13-18 min，20%A;18-20 min，20% A→3% A.The detection wavelength was 210 nm， and the content of morphine in Xuanfei Zhisou Mixture was determined by flow rate of 1.0 mL/min and column temperature of 30 ℃.The content of morphine in Papaver somniferum husk and the husk of Papaver somniferum processed with honey was determined according to the method of content determination in Chinese Pharmacopoeia 2020 edition.[Result] The content of morphine in the husk of Papaver somniferum processed with honey was higher than the theoretical value.The transfer rate of morphine between honey poppy shell and Xuanfei Zhisou Mixture was 64.2%.The content limit of morphine in Xuanfei Zhisou Mixture was determined to be 0.021-0.141 mg/mL.[Conclusion]The method is rapid， accurate and can be used for quality control of Xuanfei Zhisou Mixture.

Key words Xuanfei Zhisou Mixture;Papaver somniferum L.;Morphine;Content determination;Limit standard

宣肺止嗽合剂为《中国药典》2020年版（一部）收载品种，由荆芥、前胡、桔梗、蜜罂粟壳等10味中药组成，具有疏风宣肺、止咳化痰之功效，用于治疗风邪犯肺证咳嗽、症见咳嗽、咽痒、鼻塞流涕、恶寒发热、咯痰[1]。现代临床研究表明，宣肺止嗽合剂可明显改善感冒后遗咳嗽[2]，对治疗细菌性肺炎引起的咳嗽、痰多效果明显[3]。方中蜜罂粟壳主要含吗啡等生物碱成分，具有镇痛、镇咳和抑制呼吸等药理作用，连续服用易产生依赖性、瘾癖，超剂量使用会出现呃逆、呼吸困难、昏迷等中毒症状[4]。鉴于此，应对吗啡的含量进行严格控制。宣肺止嗽合剂的含量测定最早收载于《中国药典》2015年版一部，起草宣肺止嗽合剂含量测定方法时未充分考虑其原料药罂粟壳蜜制之后吗啡含量的变化以及原料药与成药之间的转移率，导致含量合格的蜜罂粟壳原料药进行投料出现含量不合格的宣肺止嗽合剂。另外《中国药典》2020年版一部采用HPLC法测定吗啡含量[5]，但所用有机溶媒毒性强、前处理烦琐、易造成待测充分吗啡损失，同时对色谱柱的要求也较高。因此，该研究拟建立简便易行的测定宣肺止嗽合剂中吗啡含量的HPLC法，考察罂粟壳中吗啡转移率，制定较为合理的宣肺止嗽合剂中吗啡限量标准，为宣肺止嗽合剂的质量控制提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器 Waters E2695型高效液相色谱仪，美国Waters公司;ME24-102型万分之一电子天平、XS205DU十万分之一型电子天平，瑞士梅特勒-托利多公司;KQ-250E数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

1.2 试材 吗啡对照品（批号171201-201324，含量≥93.9%），购于中国食品药品检定研究院;乙腈为色谱纯，磷酸为优级纯，甲醇为分析纯，水为超纯水。5批罂粟壳药材购自甘肃普安制药有限公司，经马潇主任药师鉴定为罂粟科植物罂粟（Papaver somniferum L.）的干燥成熟果壳，参照《中国药典》2020年版四部通则0213蜜炙法制成蜜罂粟壳5批，每100 kg罂粟壳用20 kg炼蜜;以蜜罂粟壳为原料制成的宣肺止嗽合剂，每批蜜罂粟壳制3批合剂，共计15批。

1.3 方法

1.3.1 对照品溶液的制备。精密称取吗啡对照品11.88 mg，置于25 mL容量瓶中，加含5%磷酸的20%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀后取1 mL置于25 mL容量瓶中，加入5%磷酸的20%甲醇，制成质量浓度为0.017 991 mg/mL的吗啡对照品溶液。

1.3.2 供试品溶液的制备。精密量取宣肺止嗽合剂样品2 mL，置于10 mL棕色容量瓶中，加含5%磷酸的20%甲醇溶液，密塞，超声处理（功率200 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再继续用含5%磷酸的20%甲醇溶液加至刻度，摇匀，即得。

1.3.3 空白对照溶液的制备。按照处方比例称取除蜜罂粟壳的其他药材适量，依照宣肺止嗽合剂制法制得阴性对照样品，再按“1.3.2”方法制得空白对照溶液。

1.3.4 色谱条件。资生堂CAPCELL PAK C18 MG色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 μm）;流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B），梯度洗脱：0～12 min，3% A→5%A;12～13 min，5% A→20%A;13～18 min，20%A;18～20 min，20% A→3% A;20～23 min，3%A;检测波长210 nm，流速1.0 mL/min，柱温30 ℃;进样量10 μL。

1.3.5 方法学考察。

1.3.5.1 线性关系考察。取吗啡对照品溶液适量，加含5%磷酸的20%甲醇溶液配制0.004 448、0.008 896、0.022 240、0.044 480、0.088 960、0.222 394 mg/mL的系列浓度，进样测定，以峰面积为横坐标、浓度为纵坐标，绘制标准曲线。

1.3.5.2 精密度试验。取吗啡对照品溶液10 μL（浓度为0.044 480 mg/mL），重复进样6次，计算吗啡峰面积的RSD。

1.3.5.3 重复性试验。取同一批宣肺止嗽合剂（编号S-X5-1）平行制备6份供试品溶液，计算吗啡含量的RSD。

1.3.5.4 稳定性试验。取同一批宣肺止嗽合剂（编号S-X5-1）制备供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、16、20、24 h进样测定，计算吗啡含量的RSD。

1.3.5.5 加样回收率试验。采用加样回收法，分别精密量取已知吗啡含量的宣肺止嗽合剂（编号S-X5-1）样品9份，分3组，取样量各为1 mL，精密加入低、中、高（0.5倍、1.0倍、1.5倍）3个浓度的吗啡对照品，按照“1.3.2”方法制备供试品溶液，并按“1.3.4”色谱条件进行检测，计算加样回收率。

1.3.6 样品测定。按照《中国药典》2020年版一部“罂粟壳”项下含量测定方法测定5批次罂粟壳和蜜罂粟壳中吗啡的含量;再取15批次宣肺止嗽合剂，分别精密量取2 mL，按照“1.3.2”方法制备供试品溶液，以“1.3.4”色谱条件进行测定，以外标法计算样品中吗啡的含量。

1.3.7 蜜炙系数计算。5批罂粟壳分别以蜜炙法炮制，每100 kg罂粟壳用20 kg炼蜜，平均每批制成约118.5 kg的蜜罂粟壳，则在蜜罂粟壳中的罂粟壳实际占有量为98.75 kg，即蜜罂粟壳中的吗啡含量理论值计算如下：

蜜罂粟壳中吗啡含量理论值（mg/g）=罂粟壳中吗啡含量测定值（mg/g）×98.75 kg118.5 kg

根据蜜罂粟壳中吗啡含量实测值与理论值差异，计算蜜炙系数，公式如下：

蜜炙系数=蜜罂粟壳中吗啡含量实测值（mg/g）蜜罂粟壳中吗啡含量理论值（mg/g）