解酒茶配方优化及对急性酒精中毒小鼠解酒作用的研究

摘要 [目的]采用葛根、枳椇子、红茶和罗汉果进行解酒袋泡茶产品的配方优化，并探讨其解酒功效。[方法]应用D-最优混料设计法研究解酒茶的最优配方，建立各原料配比与解酒活性物质总黄酮含量及感官审评分数的回归方程，并建立小鼠急性酒精中毒模型，观察小鼠醉酒行为学指标，采集小鼠血液检测乙醇含量，采集小鼠肝脏检测乙醇脱氢酶（ADH）、乙醛脱氢酶（ALDH）水平。[结果]配方优化获得解酒茶各原料最优添加比例为红茶50.0%、葛根41.7%、枳椇子8.3%、罗汉果0%。该配方袋泡茶各项指标为总黄酮含量26.12 mg/g，感官评分88.10分，口感甘醇，富含解酒活性成分。功效试验结果表明，解酒茶各剂量组平均延长醉酒潜伏期24.44 min，缩短醉酒维持时间205.18 min，明显改善醉酒小鼠的行为学指标。同时，低、中、高剂量组显著降低小鼠饮酒后1、2 h的血乙醇浓度（P<0.05）;且中剂量组小鼠血乙醇浓度在3 h后依旧显著低于模型组（P<0.01）。此外，高剂量组显著提高了肝脏ALDH的活性（P<0.01）。[结论]解酒茶香气怡人，滋味醇和，且具有良好的解酒、醒酒功效，能满足大健康时代“绿色、天然、健康、便捷”的日常解酒需求。

关键词 葛根;枳椇子;红茶;罗汉果;解酒茶;配方优化;解酒功效

中图分类号 TS272.5文献标识码 A文章编号 0517-6611（2022）19-0165-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.19.040

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Study on Formula Optimization of Anti-alcoholism Tea and Its Anti-alcoholism Effect on Mice with Acute Alcoholism

ZHU Jia-yi， YUAN Hai-bo， HUA Jin-jie et al

（National Engineering Technology Research Center for Tea Industry， Key Laboratory of Tea Biology and Resources Utilization， Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Key Laboratory of Tea Processing Engineering of Zhejiang Province， Tea Research Institute， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Hangzhou，Zhejiang 310008）

Abstract [Objective]To optimize the formula of anti-alcoholism teabag products with Radix Puerariae， Semen Hoveniae， black tea and Siraitia grosvenorii， and to explore their anti-alcoholism effects. [Method]The D-optimal mixture design method was used to study the optimal formula of anti-alcoholism tea， and establish a regression equation of the ratio of each raw material， the content of total flavonoids and the sensory evaluation score of active substances for relieving alcoholism. The acute alcoholism model was established by alcohol gavage， and the behavior indexes of drunkenness in mice were observed. The blood of mice was collected to detect the alcohol content， and the liver of mice was collected to detect the levels of ADH and ALDH. [Result]The optimal addition ratio of each raw material of anti-alcoholism tea was obtained by optimizing the formula： black tea 50.0%， Radix Puerariae 41.7%， Semen Hoveniae 8.3% and Siraitia grosvenorii 0%. The index value of the teabag obtained under this formula was that the content of total flavonoids was 26.12 mg/g， the sensory score was 88.10 points， the taste was sweet and mellow， and it was rich in anti-alcoholism active ingredients. The results of the efficacy test showed that each dose group of anti-alcoholism tea prolonged the incubation period of intoxication by 24.44 minutes， shortened the maintenance time of intoxication by 205.18 minutes， and significantly improved the behavioral indicators of intoxicated mice.At the same time， the low， medium and high dose groups significantly reduced the serum ethanol concentration of mice at 1h and 2h after drinking （P< 0.05）. Moreover， the serum ethanol concentration in the middle dose group was still significantly lower than that in the model group after 3 hours （P<0.01）. In addition， the activity of ALDH in liver was significantly increased in the high dose group （P<0.01）. [Conclusion]Anti-alcoholism tea has pleasant aroma， mellow taste， and good anti-hangover and sobering effects， which can meet the daily anti-hangover needs of the public seeking "green， natural， healthy and convenient".

Key words Radix Puerariae;Semen Hoveniae;Black tea;Siraitia grosvenorii;Anti-alcoholism tea;Optimization of formula;Anti-alcoholism effect

随着经济发展和生活水平提高，饮酒人数逐年增加，急性酒精中毒的发生率随之大幅增加，不但严重损害大众健康，也非常容易产生许多社会问题[1-2]。研究发现，乙醇进入机体后主要依靠肝脏代谢，由乙醇脱氢酶作用后转化为乙醛，再在乙醛脱氢酶的作用下转化为乙酸，从而排出体外[3-4]。在乙醇的代谢过程中，会使机体氧化性应激增强，导致肝脏机体的损伤[5-6]。因此，在不能立刻拒绝饮酒时，解酒保肝成为克服饮酒所带来的伤害的又一途径。我国的药食同源植物资源丰富，自古以来已发现众多具有解酒保肝、抗氧化功效的植物，此外由于作用独特、方便携带、应用广泛等优点，袋泡茶这一形式广受市场青睐。

葛根、枳椇子是我国药食同源物质，其营养价值和药用价值十分丰富，也是经典的解酒原料。根据《千金要方》《神农本草经》等古代医药文献中记载，葛根在唐代就被用于“解酒毒”[7-8]。葛根中所含的葛根异黄酮等生物活性物质可以清除乙醇及代谢产物，具有解酒护肝作用[9-10]。枳椇子，鼠李科植物枳椇的成熟种子，《本草纲目》等文献记载，枳椇子在民间亦被广泛用于“治酒病”。药理研究表明，枳椇的解酒、护肝和抗病毒等作用均与其中的黄酮类成分有关[11]，且中医处方也验证两者之间无配伍禁忌，结合使用具有止渴除烦、清湿热、解酒毒的功效[12]。茶叶中大量的茶多酚和茶褐素可显著降低乙醇和乙醛浓度，提高肝中乙醇脱氢酶（ADH）、乙醛脱氢酶（ALDH）酶活性，并缩短醉酒小鼠醉睡时间[13]，咖啡碱通过兴奋大脑，还可以达到“醒酒”的效果，但茶汤浓度不宜太高[14]。罗汉果中含有的黄酮类等成分都利于解酒醒酒、保护肝脏[15]。另外饮茶还可以稀释酒精，促进胃肠蠕动，减少酒精的吸收。但是，目前研究多集中于解酒配方的优化[5，16]，往往忽略了感官口感的需求，或局限于单一功能评价手段[17-18]，缺乏全面和系统的研究。同时，将解酒类药食同源原料与红茶联合应用于袋泡茶方面的研究也鲜有报道。

因此，该研究选择葛根、枳椇子、红茶和罗汉果作为配方基础，以解酒活性物质总黄酮及感官审评分数为指标，研究解酒袋泡茶的配方优化;通过建立急性酒精中毒小鼠模型，观察醉酒行为学指标以及测定血乙醇含量、肝脏生化指标，探讨葛根、枳椇子、红茶、罗汉果混合配方解酒袋泡茶的解酒功效，为解酒茶类产品研发提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试材。

葛根（益阳神奇草养生茶业有限公司），枳椇子（深圳市泰斯古德食品实业有限公司），罗汉果（上海梅家坞茶业有限公司），红茶（课题组自制）;实验动物：SPF级雄性ICR小鼠100只，体质量18～22 g，由杭州医学院提供，许可证号SCXK（浙）2019-0002。动物饲养于清洁级动物房，设定室温20～26 ℃，湿度40%～70%，光照12 h明暗交替。

1.1.2

药物及试剂。海王金樽（深圳市海王健康科技发展有限公司，批号20210302）;56°北京二锅头酒（北京二锅头酒业股份有限公司，批号20201118）;血乙醇（ALC）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号20210802）;乙醇脱氢酶（ADH）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号20211101）;乙醛脱氢酶（ALDH）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号20211101）;BCA蛋白浓度测定试剂盒（碧云天生物技术有限公司，批号1221221323）。亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、三氯化铝（上海国药，分析纯）;芦丁对照品（源叶生物科技有限公司，纯度95%）。

1.1.3 仪器与设备。

Centrifuge 5810R型离心机（Eppendorf公司）;Power Wave XS型全波长酶标仪（Gene 公司）;T10型自动组织匀浆机（IKA公司）;HH2型数显恒温水浴锅（力辰科技有限公司）;UV-1800型紫外分光光度计（岛津公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 解酒茶的配方优化设计。

使用粉碎机将葛根、枳椇子、红茶和罗汉果适当粉碎过6号筛，备用。配方试验以感官评分（香气、汤色、滋味）和总黄酮含量作为评价指标，采用试验设计软件Design Expert中混料设计D-Optional方法对解酒茶的配方进行优化[19]，确定葛根、枳椇子、罗汉果和红茶的最佳配比。设定葛根（A）、枳椇子（B）、红茶（C）和罗汉果（D）为4个参数，其中红茶与罗汉果在配方中所占比例不超过50%，A + B + C + D = 100%，经预试验后葛根、枳椇子、红茶和罗汉果的质量选定范围如表1所示。

1.2.2 解酒茶总黄酮含量测定。

以芦丁为标准品，采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定总黄酮含量[20-21]，标准曲线为y=6.527 7x+8×10-5（R2=0.999 4）。取配备好的解酒茶（3 g/袋），加入150 mL 100 ℃纯净水冲泡5 min。用移液枪精确吸取1 mL解酒茶茶汤置于25 mL容量瓶中，采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法得到待测样品，在波长511 nm处测定吸光度，通过标准曲线计算出总黄酮含量。

1.2.3 解酒茶的感官评价。

取制备好的袋泡茶以150 mL的100 ℃蒸馏水冲泡5 min后，组织5名品评员分别从汤色、香气和滋味进行品评打分。感官评分标准参照GB/T 24690—2018《袋泡茶》制定，并结合产品特点进行适当修改（表2）。

1.2.4 动物分组及给药。