不同生长年限甘草不同药用部位质量研究
作者: 王永福 范伟兵 马恩耀 吴进轩 李红平 安子龙 陈建雷 朱宣青 王文博
摘要 [目的]探究新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市不同药用部位和生长年限的甘草中甘草苷和甘草酸含量差异,为有效控制其质量提供依据。[方法]以《中国药典》(2020年版)规定的甘草中有效成分甘草苷和甘草酸为检测标准,采用高效液相色谱法测定并比较新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市甘草药材不同药用部位和生长年限中甘草苷和甘草酸含量,以化学成分角度来探讨中药的质量。[结果]甘草各药用部位甘草苷和甘草酸含量从高到低依次为侧根>主根>全根>浮根>须根>芦头;侧根、主根和全根中甘草苷含量符合《中国药典》(2020年版)的规定(≥0.50%);侧根中甘草酸含量符合《中国药典》(2020年版)的规定(≥2.0%);3年生甘草药材质量最佳。[结论]传统加工方式中直接除去的须根,可作为提取甘草苷的原材料。该研究可为甘草的采收、加工、规格等级划分提供参考依据。
关键词 甘草;质量研究;药用部位;生长年限;甘草苷;甘草酸
中图分类号 R 282 文献标识码 A
文章编号 0517-6611(2025)02-0183-04
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2025.02.036
开放科学(资源服务)标识码(OSID):
Study on the Quality of Different Medicinal Parts of Glycyrrhiza uralensis with Different Growth Years
WANG Yong-fu FAN Wei-bing MA En-yao2 et al
(1.Gansu Guangyao Baiyunshan Traditional Chinese Medicine Technology Co.,Ltd., Dingxi,Gansu 743000;2.Guangdong Hanchao Traditional Chinese Medicine Technology Co., Ltd.,Guangzhou,Guangdong 510000)
Abstract [Objective]To explore the contents of liquiritin and glycyrrhizic acid in different medicinal parts and growth years of Glycyrrhiza uralensis in Korla, Bayingol Mongolia Autonomous Prefecture, Xinjiang, so as to provide basis for effective quality control.[Method]Taking the active components liquiritin and glycyrrhizic acid in Glycyrrhiza uralensis stipulated in the 2020 edition of Pharmacopoeia of the People’s Republic of China as the detection standard, the contents of liquiritin and glycyrrhizic acid in different medicinal parts and growth years of Glycyrrhiza uralensis in Korla, Bayingol Mongolia Autonomous Prefecture of Xinjiang were determined and compared by HPLC, and the quality of traditional Chinese medicine was discussed from the point of view of chemical composition.[Result]The order of the content of liquiritin and glycyrrhizic acid in various medicinal parts of licorice was lateral root>main root>whole root>floating root>fibrous root>reed head;the contents of liquiritin in lateral root, main root and whole root met the requirements of the Chinese Pharmacopoeia (2020 edition) (≥0.50%);the content of glycyrrhizic acid in lateral roots met the requirements of the Chinese Pharmacopoeia (2020 edition) (≥2.0%);three-year-old Glycyrrhiza uralensis had the best quality.[Conclusion]The fibrous root directly removed in the traditional processing method can be used as the raw material for the extraction of liquiritin.This study can provide reference for the harvesting, processing and grading of licorice.
Key words Glycyrrhiza uralensis;Quality study;Medicinal parts;Growth years;Liquiritin;Glycyrrhizic acid
甘草是豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)或胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Bat.)的根茎和干燥根[1],其主要成分包含甘草酸和甘草苷,具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药等功效[2-5],主要生长地在我国新疆、甘肃、内蒙古、宁夏等地[6],其药用来源有野生和栽培之分,生长环境的差异对甘草药材的质量具有一定影响[7]。
从20世纪80年代开始,库尔勒市(85°11′45″~86°30′04″E、41°14′12″~42°16′02″N)开始了甘草人工栽培技术的种植,地理气候条件和生物资源均具有多样性和特殊性,有着丰富的中药民族药资源,是新疆重要的中药材生产基地,该地区光热资源丰富、昼夜温差大,有利于甘草的生长,在同等肥料及管理模式作用下,甘草的产量普遍较高,适宜甘草种植[8]。笔者以甘草主产区内新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市栽培甘草为材料,比较分析不同生长年限(1年生、2年生和3年生)及不同药用部位(侧根、主根、全根、浮根、须根、芦头)有效成分的差异性,为栽培甘草的采收、加工、规格等级划分提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 仪器。LC-40D液相色谱仪(株式会社岛津制作所);PL-S40T超声波清洗器(东莞康士洁超声波科技有限公司);PTY-105/124L十万分之一电子天平(华志电子科技有限公司);PTY-224/323L万分之一电子分析天平(华志电子科技有限公司);Direct-Pure UP UV 10纯水仪(上海乐枫生物科技有限公司)。
1.1.2 试剂。甘草苷对照品(含量95.2%,批号111610-202209)、甘草酸铵对照品(含量94.4%,批号110731-202122),均购自中国食品药品检定研究院。乙腈,色谱纯,天津市康科德科技有限公司;乙醇,分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司;磷酸,分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司。
1.1.3 试材。甘草采自新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市普慧乡共8批样品,其中1年生2批、2年生3批、3年生3批,均为人工育苗移栽,秋季采收,经甘肃农业大学陈垣教授鉴定为胀果甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)的干燥根,产地采收后,经自然干燥方式干燥,8批样品分别取其侧根、主根、全根、浮根、须根、芦头6个药用部位进行研究。
1.2 甘草中甘草苷、甘草酸含量测定
1.2.1 色谱条件。ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(规格250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为乙腈,B为0~0.05%磷酸溶液,梯度洗脱详见表1;柱温30 ℃;检测波长237 nm;流速1.0 mL/min;进样量10 μL[3]。
1.2.2 混合对照品溶液制备。精确称取0.2 mg甘草苷对照品与20 mg甘草酸铵对照品,以50 mL 70%乙醇溶解制成混合对照品溶液(甘草苷浓度0.042 10 mg/mL、甘草酸铵浓度0.373 50 mg/mL)备用[ 9]。
1.2.3 供试品溶液制备。取过3号筛的甘草粉末约0.2 g,精密称定后置具塞锥形瓶,加入70%乙醇100 mL后密封,称重,超声(功率250 W,频率40 kHz)30 min,冷却后再次称重,用70%乙醇补齐减重,摇匀过滤得续滤液[2]。
1.2.4 方法学考察。
1.2.4.1 系统适应性试验。利用高效液相色谱仪自动进样器精密吸取混合对照品和供试品溶液各10 μL测定,记录图谱,考察系统适应性。
1.2.4.2 线性关系考察。准确称取对照品甘草苷2 mg、甘草酸铵20 mg,加入70%乙醇定容至50 mL,浓度分别为0.042 10、0.373 50 mg/mL,作为对照品溶液。精密量取甘草苷、甘草酸铵对照品溶液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0 mL置于5 mL容量瓶,以70%乙醇定容得系列浓度混合对照品溶液,按照“1.2.1”色谱条件测定。以对照品溶液浓度(mg/mL)为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算线性回归方程[9]。
1.2.4.3 仪器精密度试验。精密吸取混合对照品溶液10 μL,按照“1.2.1”色谱条件重复进样5次,计算甘草酸铵、甘草苷峰面积的RSD[3]。
1.2.4.4 重复性试验。取同一批供试品溶液连续进样5次,按照“1.2.1”色谱条件测定,计算甘草苷、甘草酸的含量及其RSD。
1.2.4.5 稳定性试验。取同一供试品溶液,分别于0、2、4、8、12、16、20、24 h按照“1.2.1”色谱条件进行测定,计算甘草苷、甘草酸的含量及其RSD[1]。