添加枯草芽孢杆菌和锁掷酵母对大黄鱼仔稚鱼育苗水处理效果的影响
作者： 章霞 王易帆 陈爽 李伟业 殷小龙 徐羡
摘要 为探究枯草芽孢杆菌和锁掷酵母对大黄鱼仔稚鱼育苗水处理效果的影响，设置对照组、锁掷酵母（104 CFU/mL）组、枯草芽孢杆菌组（104 CFU/mL）、锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（103、104、105 CFU/mL）组，研究各组不同时间水质指标的变化。结果表明：单一菌12～72 h时，锁掷酵母和枯草芽孢杆菌水体中亚硝酸盐去除率均高于对照组；锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（103 CFU/mL）组亚硝酸盐去除率在各个时间段均最高，72和96 h时显著高于其他各组（P<0.05）；24 h时，锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（103 CFU/mL）组氨氮去除率最高。添加微生物对水体中硝酸盐、总有机碳的去除均有一定促进作用。以上研究结果表明，枯草芽孢杆菌和锁掷酵母的添加有助于大黄鱼仔稚鱼育苗水处理中氨氮和亚硝酸盐的去除，浓度以锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（103 CFU/mL）为宜。
关键词 枯草芽孢杆菌；锁掷酵母；水处理
中图分类号 S 965.322 文献标识码 A
文章编号 0517-6611（2025）04-0063-04
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.04.013
开放科学（资源服务）标识码（OSID）：
Influences of Adding Bacillus subtilis and Sporidiobolus pararoseus on Water Treatment Effects in the Seedling of Larimichthys crocea Larva and Juvenile
ZHANG Xia，WANG Yi fan，CHEN Shuang et al
（Zhoushan Fisheries Research Institute of Zhejiang Province，Zhoushan，Zhejiang 316000）
Abstract In order to investigate the influences of Bacillus subtilis and Sporidiobolus pararoseus on the water treatment effects in the seedling of Larimichthys crocea larva and juvenile， the control group，S.pararoseus（104 CFU/mL） group，B.subtilis group （104 CFU/mL），and S.pararoseus （104 CFU/mL）+B.subtilis （103，104，105 CFU/mL） groups were designed to study the changes of water quality indices at different time in different groups.The results show that the removal rate of nitrite in the water body of S.pararoseus and B.subtilis was higher than that of control group from 12 h to 72 h.The removal rate of nitrite in the groups of S.pararoseus （104 CFU/mL）+B.subtilis （103 CFU/mL） were the highest at different time，and it was significantly higher than that of other groups at 72 and 96 h （P<0.05）.The removal rate of ammonia nitrogen was the best in S.pararoseus （104 CFU/mL） + B.subtilis （103 CFU/mL） at 24 h.The addition of microorganism had certain effect on the removal of TOC and nitrate in water body.The above results showed that the addition of B.subtilis and S.pararoseus could help to remove ammonia nitrogen and nitrite from the water body of the seedling of L.crocea larva and juvenile and the group of S.pararoseus （104 CFU/mL） + B.subtilis （103 CFU/mL） had the best removal effect.
Key words Bacillus subtilis;Sporidiobolus pararoseus;Water treatment
基金项目 浙江省基础公益研究计划项目（LGN22C190011）；舟山市公益类科技项目（2022C31048）。
作者简介 章霞（1989—），女，浙江兰溪人，工程师，硕士，从事微生物开发与利用以及水产养殖研究。*通信作者，高级工程师，博士，从事海水养殖方面的研究。
收稿日期 2024-03-25
大黄鱼（Larimichthys crocea）作为国家海水鱼产业技术体系中的主要品种，是我国八大优势出口养殖水产品之一，在我国海水鱼类中占有重要地位［1-2］。据《2023中国渔业统计年鉴》显示，2022年大黄鱼产量已经达到257 683 t，同比增长1.36%［3］。大黄鱼高密度规模化育苗奠定了产业快速发展的基础，在苗种培育阶段会根据仔稚鱼苗的不同发育阶段而投喂轮虫、卤虫、桡足类以及配合饲料等饵料。高密度高投入的养殖模式会导致水体中氨氮、亚硝酸盐等水质指标急剧升高，如何调控水质成为技术关键。
微生物处理法是一种常见的水处理方法，通过向水体中加入各种有益菌抑制病菌生长，净化水质。常用的有益菌主要包括硝化细菌、光合细菌、芽孢杆菌、乳酸杆菌等［4-5］。刘慧玲等［6］在罗非鱼鱼苗养殖水体中加入不同浓度的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），结果发现枯草芽孢杆菌组氨氮和亚硝酸盐含量显著低于对照组；陆家昌等［7］研究表明枯草芽孢杆菌能显著降低对虾养殖水体中的化学需氧量（COD）和氨氮（NH 4+-N）含量，抑制亚硝酸氮（NO 2--N）的产生；胡凡光等［8］研究表明枯草芽孢杆菌制剂能够显著降低养殖水体中的氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮浓度。
锁掷酵母（Sporidiobolus pararoseus）属于担子菌门掷孢酵母科锁掷酵母属［9］，因其与红酵母属种类特征相近，可视为广义上的红酵母［10］。研究表明，锁掷酵母具有降低氧化应激损伤、改善蛋黄颜色、降解展青霉素等功效［11-13］；Zeng等［14］研究表明锁掷酵母具有一定的水质处理能力，但目前将锁掷酵母应用于水产养殖水处理的研究尚属空白。
为加强水产适用微生物菌种的开发利用，笔者通过在水体中添加不同剂量的枯草芽孢杆菌和锁掷酵母，探究其对大黄鱼仔稚鱼育苗水处理效果的影响，旨在为锁掷酵母及枯草芽孢杆菌在水产养殖中的应用提供科学参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料及其分组 2023年4月22日开始，取大黄鱼仔稚鱼育苗下层水体置于统一塑料桶中，水体体积18 L，设置对照组、锁掷酵母（104 CFU/mL）组、枯草芽孢杆菌组（104 CFU/mL）、锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（103 CFU/mL）组、锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（104 CFU/mL）组、锁掷酵母（104 CFU/mL）+枯草芽孢杆菌（105 CFU/mL）组，分别记为O、S、B 2、S+B 1、S+B 2、S+B 3组，连续曝气培养4 d。
试验用锁掷酵母和枯草芽孢杆菌均由笔者所在实验室从海水环境中分离获得并保存。
1.2 水质指标的测定
每组分别在6、12、24、48、72、96 h取样，用于测定水体中氨氮、亚硝酸盐、总有机碳（TOC）含量。总有机碳（TOC）含量使用总有机碳分析仪 TOC-LCPH CN200 进行测定；氨氮含量采用HJ 535—2009《水质 氨氮的测定 纳氏试剂分光光度法》［15］测定，亚硝酸盐含量采用GB 7493—87《水质 亚硝酸盐氮的测定 分光光度法》［16］测定，硝酸盐含量采用 HJ/T 346—2007《水质 硝酸盐氮的测定 紫外分光光度法（试行）》［17］进行测定。
1.3 数据统计与分析
试验数据使用 SPSS 20软件进行统计分析，采用Tukey’s 检验方法进行多重比较，试验结果均以平均值±标准误表示，显著性水平为0.05。
2 结果与分析
2.1 添加枯草芽孢杆菌和锁掷酵母对大黄鱼仔稚鱼育苗水体中亚硝酸盐去除率的影响
从表1可以看出，6 h时，S+B 1组亚硝酸盐去除率最高，显著高于O组、B 2组和S+B 2组（P<0.05）。12 h时，S+B 1组略高于S+B 2组、B 2组，但差异均不显著（P>0.05）;S+B 1组、S+B 2组、B 2组亚硝酸盐去除率显著高于O组（P<0.05），O组显著高于S+B 3组（P<0.05）。24 h时，B 2组和S+B 1组亚硝酸盐去除率显著高于S+B 3组（P<0.05）。48 h时，S+B 1组亚硝酸盐去除率显著高于S+B 3组（P<0.05）。72 h时，S+B 1组亚硝酸盐去除率显著高于S+B 2组、S组、B 2组、S+B 3组（P<0.05），而各微生物添加组均显著高于O组（P<0.05）。96 h时，S+B 1组亚硝酸盐去除率显著高于其他各组（P<0.05）。综合来看，在各个时间段S+B 1组亚硝酸盐去除率均最高，72和96 h时显著高于其他各组（P<0.05）。
2.2 添加枯草芽孢杆菌和锁掷酵母对大黄鱼仔稚鱼育苗水体中氨氮去除率的影响