气相色谱-串联质谱法同时测定当归中35种禁用农药残留量

摘要  ［目的］利用气相色谱－串联质谱（GC-MS/MS）建立同时测定当归中35种禁用农药残留量的分析方法。［方法］色谱柱为HP-5MSUI（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；载气流量1.2 mL/min；进样量1 μL，不分流进样；进样口温度280 ℃；程序升温。样品以乙腈直接提取，采用GC-MS/MS的多反应监测分析模式，通过基质匹配标准溶液降低基质干扰，内标法定量。［结果］35种禁用农药在各自浓度范围内线性良好，相关系数均不低于0.985 2，检出限为0.155 5～7.173 9 μg/kg，定量限为0.513 2～23.673 9 μg/kg，精密度RSD均小于14%（n=6）。平均加样回收率为83.86%～122.80%，RSD为3.8%～24.6%（n=5）。［结论］该方法快捷、准确，可用于当归中禁用农药残留的定性和定量分析。

关键词  当归；禁用农药残留量；气相色谱-串联质谱法

中图分类号  S 481+.8   文献标识码  A   文章编号  0517-6611（2023）05-0198-05

doi： 10.3969/j.issn.0517-6611.2023.05.045

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Simultaneous Determination of 35 Banned Pesticide Residues in Angelica sinensis by GC-MS/MS

WU Fu-xiang， LI Jian， ZHU Ren-yuan et al

（Lanzhou Institute for Food and Drug Control/Key Laboratory of Pesticide and Veterinary Drug Monitoring for State Market Regulation /Gansu Engineering Research Center for Monitoring Exogenous Harmful Residues in Traditional Chinese Medicines， Lanzhou，Gansu 730050）

Abstract  ［Objective］ A method for simultaneous determination of 35 banned pesticide residues in Angelica sinensis was established by gas chromatography-tandem mass spectrometry （GC-MS/MS）. ［Method］ Chromatographic column was HP-5MSUI（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;gas traffic was 1.2 mL/min;injection volume was 1 μL， no split injection;injection temperature was 280 ℃;the program heats up.The samples were extracted directly with acetonitrile， and the multi-reaction monitoring and analysis mode of GC-MS/MS was used. Matrix interference was reduced by matrix matching standard solution， and the internal standard method was used for quantification. ［Result］ The 35 banned pesticides had good linearity within their respective concentration range， the correlation coefficient was not less than 0.985 2，the limit of detection was 0.155 5-7.173 9 μg/kg， the limit of quantification was 0.513 2-23.673 9 μg/kg， the RSD of precisions were all less than 14%（n=6）， the average recovery rate was 83.86%-122.80%， and the RSDs were 3.8%-24.6%（n=5）. ［Conclusion］ The method is rapid and accurate， and can be used for qualitative and quantitative analysis of banned pesticide residues in Angelica sinensis.

Key words  Angelica sinensis;Banned pesticide residues;Gas chromatography tandem mass spectrometry （GC-MS/MS）

中医药是我国文明的宝贵遗产，在几千年的历史中不断进步，为人类的健康作出了重大的贡献。中药作为中医药体系的核心组成部分，一直以来都受到人们的充分重视。甘肃省是我国中药材的主产区之一，素有“千年药乡”和“天然药库”的美誉，中药资源十分丰富。据2019年统计，甘肃省中药材种植面积31.33万hm2，产量52万t，产值超32亿元；其中，当归、板蓝根、党参等道地药材产量分别占全国市场的95%、65%、60%，种植面积及产量居全国前列［1］。近年来，中药的质量安全问题阻碍了我国中药产品进入国际市场，主要原因就是农药残留、重金属及真菌毒素等外源性污染问题。其中，农药残留污染主要有3个方面：一是种植过程中，施用农药防治病虫害，造成农药滥用的直接污染；二是土壤和空气中残留的农药造成的间接污染；三是采收加工、储存运输过程中造成的污染［2-6］。随着农药使用范围和使用量的不断扩大，农药造成的环境污染和食品药品安全问题逐渐暴露，如六六六、杀虫脒、除草醚、艾氏剂、狄氏剂、苯线磷等农药残留超标现象时有发生［7］。基于此，该试验采用GC-MS/MS建立同时测定当归中35种禁用农药的残留检测方法，以期为控制当归质量提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1    仪器。7890B-7000D气相色谱-串联质谱仪（美国安捷伦公司）；ME204/02万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；AH40全自动均质器（厦门睿科集团）；UPU-1-20T超纯水机（四川优普超纯科技公司）；5810R离心机（德国Eppendorf公司）；EVA50A氮吹仪（北京普立泰科仪器有限公司）。

1.1.2    试剂。35种农药对照品：甲基对硫磷（G163528，0.1 g，98.2%）、对硫磷（G130512，0.1 g，98.0%）、久效磷（G833027，0.1 g，98.0%）、α-六六六（G130554，0.1 g，98.1%）、β-六六六（G138918，0.1 g，98.6%）、γ-六六六（G129950，0.25 g，98.8%）、δ-六六六（G132134，0.05 g，99.2%）、4，4′-滴滴涕（G12082000，0.1 g，99.5%）、2，4′-滴滴涕（G12081000，0.1 g，99.6%）、4，4′-滴滴伊（G130552，0.1 g，99.7%）、4，4′-滴滴滴（G123407，0.25 g，98.7%）、杀虫脒（G150101，0.1 g，99.5%）、除草醚（G149884，0.1 g，98.1%）、艾氏剂（G16913910，100 ng/μL）、狄氏剂（H171083CY，100 ng/μL）、苯线磷（C13421000，0.25 g，99.5%）、蝇毒磷（G92054，0.1 g，98.0%）、治螟磷（G108121，0.1 g，98.9%）、特丁硫磷（G158932，0.1 g，97.8%）、甲拌磷（BCBZ5040，0.1 g，95.4%）、甲基异柳磷（G122317，0.05 g，97.5%）、O-内吸磷（993046CY，10 ng/μL）、S-内吸磷（G1045602，0.1 g，98.3%）、灭线磷（G150818，0.1 g，98.2%）、水胺硫磷（G126442，0.1 g，99.7%）、α-硫丹（G150002，0.1 g，98.1%）、β-硫丹（G139276，0.1 g，99.6%）、硫丹硫酸酯（G1042736，0.1 g，100%）、氟虫腈（G156586，0.1 g，96.5%）、氟甲腈（13-JQW68-5，0.01 g，98.0%）、氟虫腈砜（G153662，0.05 g，98.2%）、氟虫腈亚砜（G141212，0.025 g，99.3%）、o，p′-三氯杀螨醇（219071318，100 ng/μL）、p，p′-三氯杀螨醇（G139873，0.1 g，99.7%），均购自DrEhrenstorfer公司；甲基硫环磷（S033319，100.5 ng/μL），购自Achemtek公司。内标对照品：磷酸三苯酯（G1042718，0.1 g，100%）购自DrEhrenstorfer公司。乙腈为色谱纯（德国Merck公司）；氯化钠、冰醋酸为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）；水为超纯水（Milli-Q）。

1.1.3    试材。23批当归（Angelica sinensis Radix）均采自甘肃省定西市岷县种植地，经兰州市食品药品检验检测研究院吴福祥主任药师鉴定。

1.2 试验方法

1.2.1    混合对照品溶液的配制。分别称取35种对照品各10 mg，精密称定，置10 mL容量瓶中，用乙腈稀释配制成1 mg/mL的对照储备液，密封储存于-18 ℃冰箱中。根据各农药在仪器上的响应灵敏度，准确移取一定体积的对照储备液，置25 mL容量瓶中，用乙腈稀释配制成质量浓度为100～250 μg/L的混合对照品溶液，于4 ℃避光保存。精密量取空白基质溶液1.0 mL，平行6份，置氮吹仪上于39 ℃水浴浓缩至约0.4 mL，分别加入混合对照品溶液20、40、100、200、300、400 μL，以乙腈稀释至1 mL，摇匀即得2～100 μg/L 的6个级别浓度梯度的基质匹配混合对照品溶液［8］。

1.2.2    内标溶液的配制。精密称取磷酸三苯酯内标对照品0.010 44 g，置10 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液9.58 μL，置100 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，即得内标溶液。

1.2.3    供试品溶液的配制。取供试品粉末（过3号筛）5 g，精密称定，置50 mL离心管中，加1%冰醋酸水溶液15 mL，陶瓷均质子1颗，涡旋2 min，静置30 min后，加入乙腈50 mL和氯化钠1 g，立即摇散，12 000 r/min均质1 min，3 900 r/min离心10 min后取上清液，沉淀重复上述步骤，合并2次上清液，置氮吹仪上于39 ℃水浴氮吹至尽干，用乙腈复溶并稀释至5 mL，摇匀，过0.22 μm滤膜。

1.2.4    色谱条件。安捷伦HP-5MS UI气相色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；载气为氦气，流量1.2 mL/min；程序升温：初始温度80 ℃，保持1 min，以40 ℃/min升至200 ℃，再以2 ℃/min升至230 ℃，最后以25 ℃/min升至320 ℃，保持3 min；进样量1 μL，进样口温度280 ℃，不分流进样。

1.2.5    质谱条件。EI离子源，多反应监测（multiple reaction monitoring，MRM）模式，离子源温度230 ℃，电子能量70 eV，溶剂延迟3.5 min，碰撞气（氮气）流速1.5 mL/min。