鸡蛋清蛋白肽与乳清蛋白肽生物活性研究进展
作者: 王玉 阿提坎·吾斯曼 黄卓
摘要乳清蛋白与鸡蛋清蛋白均为优质的蛋白质来源,生物活性肽为蛋白质水解后得到的具有抗氧化、降血压、免疫调节等生理功能的活性片段。比较了乳清蛋白与鸡蛋清蛋白的营养成分以及其活性肽功能,结果表明二者并无明显差异,鸡蛋清在肠内营养制剂以及保健食品开发方面有很大的潜力。
关键词乳清蛋白;鸡蛋清蛋白;生物活性肽;免疫调节
中图分类号TS253.4文献标识码A
文章编号0517-6611(2022)13-0001-03 doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2022.13.001
Study Progress on the Biological Peptides from Egg White and Whey Protein
WANG Yu Atikan Wusiman HUANG Zhuo
(1.Houde Foods Co., Ltd. Shanghai Branch,Shanghai 201100;2.Shanghai Institute of Science and Technology Management, Shanghai 201100)
AbstractBoth whey protein and egg white protein are highquality protein sources. Bioactive peptides are the active fragments obtained by hydrolysis, which showed biological functions such as antioxidant, antihypertensive and immune regulation etc. The nutrient composition and bioactive peptides of whey protein and egg white protein are overviewed. There was no significant difference between them. Egg white protein has great potential in enteral nutrition preparation and health food development.
Key wordsWhey protein;Egg white protein;Bioactive peptide;Immune regulation
鸡蛋和牛奶是两种优质蛋白质来源。2020年新冠肺炎期间,张文宏曾提出早餐食用充足的牛奶和鸡蛋来提高自身免疫力,由此可见牛奶和鸡蛋在营养学上的重要地位。相较于中国,欧洲等国家有更长的食用奶制品的历史,欧洲考古学家发现了7 000多年前有牛奶残痕的陶器。虽然我国北方一些少数民族也有制作各种奶制品的习俗,但是总体来说,“乳类制品走进百姓家”是新中国成立之后的事情。相比于乳清蛋白等乳成分,鸡蛋在食品学中的应用仍然停留在利用其物理性质如凝胶性、乳化性以及起泡性等(如利用鸡蛋清的起泡性制作戚风蛋糕),鸡蛋的营养功效并没有得到足够的重视以及充分的应用开发。
肽作为介于氨基酸和蛋白质中间的特殊形式,在机体新陈代谢和调节机制中起到很重要的作用[1],近年来关于蛋清以及乳清蛋白这两种优质蛋白质来源的活性肽功能性研究也成为了关注焦点。该研究旨在比较鸡蛋清蛋白和乳清蛋白的营养及其活性肽功能,以期扩大鸡蛋清蛋白质作为营养素来源的应用范围。
1营养比较
1.1营养成分牛奶主要由酪蛋白及乳清蛋白等组成,乳清蛋白为奶酪(酪蛋白)生产过程中的副产物,主要由α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、牛乳血清白蛋白以及免疫球蛋白等组成。鸡蛋是优质蛋白质和B族维生素的良好来源之一,蛋清蛋白质主要由卵白蛋白、卵转铁球蛋白以及卵类黏蛋白等组成。牛奶[2]和鸡蛋[3]的营养素含量如表1所示,牛奶中钙的含量高于鸡蛋,鸡蛋中的蛋白质、脂肪以及维生素A的含量明显高于牛奶。结合100 g牛奶和鸡蛋的价格而言,鸡蛋显然是一种更为经济的蛋白质来源。
1.2氨基酸模式营养学上评价各种食物蛋白质的差异常用到的一个指标为氨基酸模式,即蛋白质中各种必需氨基酸的构成比例,食物蛋白质氨基酸模式与人体蛋白质氨基酸模式越接近,必需氨基酸被机体利用的程度就越高[4]。张燕等[5-7]对鸡蛋清以及乳清蛋白等不同来源的蛋白质氨基酸组成进行了分析,其氨基酸模式如图1所示。由图1可知,鸡蛋清蛋白质的氨基酸模式与人体氨基酸模式较接近,且鸡蛋清蛋白质必需氨基酸比值/模式(除赖氨酸与缬氨酸)均高于乳清蛋白必需氨基酸比值/模式。
2.1抗氧化活性在生物体细胞内的氧化还原过程中产生的自由基可损害机体组织和细胞、促进机体衰老、引起机体产生慢性疾病。然而随着人工合成抗氧化剂的安全性受到质疑,更多的食源性肽的抗氧化功能被研究与开发。活性肽的抗氧化性能是指具有清除各种自由基、提高细胞内的抗氧化酶活性、抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应的能力。沈浥等[8]采用不同蛋白酶酶解乳清浓缩蛋白,在优化后的酶解条件下,当水解度约为19%时,10 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率为78.78%。彭新颜等[9]测定了乳清分离蛋白经碱性蛋白酶水解后的产物在不同体系中的抗氧化活性。结果显示,浓度为5%的乳清蛋白水解5 h时,其DPPH自由基清除率为45.7%。由此可见,乳清蛋白水解物的抗氧化能力与底物浓度、水解时间以及水解度有关。
蛋清蛋白肽的抗氧化活性同样受到了广泛关注,吴烨婷等[10]研究发现,蛋清经碱性蛋白酶水解后,在体外对超氧阴离子、羟基自由基、DPPH自由基清除能力和Fe3+还原能力明显优于蛋清。余芬等[11]发现,高水解度蛋清肽清除DPPH自由基的能力良好,高达72.7%。张燕等[12]对蛋清源五肽的抗氧化活性进行了评价,结果表明,经抗氧化肽预处理的保护组,随着肽浓度的升高,过氧化氢酶、超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽过氧化物酶的活性均有所提高,呈浓度依赖型关系。尤其当肽浓度为1.0 μmol/L时,过氧化氢酶活力为(20.63±0.51)U/mg蛋白、总超氧化物歧化酶活力为(179.39±5.73)U/mg 蛋白,谷胱甘肽过氧化物酶为(33.97±5.02)个活力单位,较对应损伤组的酶活性均有显著性提高(P<0.01)。可见,乳清蛋白肽与蛋清蛋白肽均具有清除各种自由基,提高细胞内抗氧化酶活性等抗氧化功效,为两种肽的协同作用研究提供了理论基础。
2.2降血压功效血管紧张素转化酶(angioten I-converting enzyme,ACE)在人体血压调节中具有重要作用,它可催化降压物质舒缓激肽分解从而导致血压升高,因此通过抑制ACE的活性能够有效地抑制机体高血压的发生[13]。来源于食物蛋白的ACE抑制肽无毒、无副作用,具有良好的应用前景,已成为当今世界研究的热点。徐思源[14]利用纯化精制后的乳清蛋白水解肽饲喂原发性高血压鼠,结果表明,乳清蛋白水解肽能降低血压和ACE活性,与对照组相比有明显的效果。
食源性降血压肽的来源较广泛,除了乳蛋白来源外,还有发酵食品来源、鱼蛋白来源、植物蛋白来源以及蛋清蛋白来源。由于蛋清中除了蛋白质其他成分含量很少,酶解产生的降血压肽易于分离纯化。陈晨等[15]利用高效液相色谱法测定蛋清蛋白酶解物及其超滤各组分的体外ACE抑制活性,结果表明,蛋清蛋白水解物的ACE抑制活性随着分子量的降低而增强(P<0.05),分子量小于3 ku的组分抑制效果最好,其IC50值为0.049 mg/mL(IC50值为半抑制浓度,是指抑制50%的ACE活性所需抑制剂的浓度,抑制活性越强其IC50值越小)。
2.3促进矿物质吸收微量元素氨基酸(小肽)螯合物具有生物利用率高、吸收快、化学结构稳定、不易与其他物质产生拮抗等特性[16]。赵立娜等[17]制备乳清蛋白多肽-钙螯合物,并且利用红外光谱法对乳清蛋白多肽和乳清蛋白多肽-钙螯合物进行分析,结果表明,乳清蛋白多肽可与钙离子螯合,螯合钙无需解离成钙离子再与蛋白质结合后再被肠道吸收,而是钙及其整个分子完整的被肠道吸收,进入血液以螯合物的形式持续解离出钙离子供机体利用[18]。玄依凡[19]对肽锌螯合物和肽的氨基酸组成和分子量分布进行了分析,结果表明,与锌发生螯合反应的氨基酸主要是酸性氨基酸,螯合后的肽锌螯合物的平均分子量为770 Da,其中分子量为180~480 Da的小肽占52.99%。
金子琪[20]以蛋清肽(Asp-His-Thr-Lys-Glu,DHTKE)为原料制备蛋清肽-钙螯合物(DHTKE-calcium),并对DHTKE及其DHTKE-calcium进行结构表征。结果表明,DHTKE具有较高的钙结合活性,并且DHTKE-calcium在肠道消化过程中具有一定的结构稳定性。此外,DHTKE-calcium与其消化物在促钙吸收作用上无显著性差异(P>0.05),表明消化不影响DHTKE-calcium的促钙吸收作用。Sun等[21]研究发现,DHTKE可与铁螯合,并且DHTKE-iron在人体胃肠道内具有良好的溶解性。可见,乳清蛋白肽和蛋清蛋白肽都能与钙、锌、铁等矿物质稳定地结合,并且在胃肠道内能够快速、持续地提供矿物质。
2.4改善记忆力记忆是大脑最基本最重要的高级神经活动之一,现代医学认为衰老会引发学习记忆和认知功能的减退。随着我国人口老龄化的加速,研究食物来源成分对人体记忆力的作用成为主流的趋势。卞辑[22]通过酶法制备乳清蛋白肽,以血清、肝脏和脑中SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、GSH-Px(谷胱氨肽过氧化物酶)、蛋白质羰基和AchE(乙酰胆碱脂酶)为指标,考察乳清蛋白抗氧化肽对衰老小鼠的保护作用。试验结果表明,乳清蛋白肽灌胃之后,衰老小鼠的SOD和GSH-Px活性明显增加,MDA和蛋白质羰基含量明显降低,高剂量组与脑复康对照组结果相近。许海丽[23]就蛋清蛋白肽对小鼠记忆和神经兴奋性的影响进行了研究,结果显示9 mg/(g·d)和18 mg/(g·d)剂量的蛋清蛋白肽可以显著改善小鼠的记忆水平,并且不同剂量的蛋清蛋白肽可以降低小鼠大脑中AchE的活力。由此可见,乳清蛋白肽与蛋清蛋白肽均能够调节中枢神经系统的活动,从而改善衰老小鼠的学习记忆能力。
2.5其他特性除具有以上功能特性外,乳清蛋白肽还具有抗菌、促进乳酸菌增殖、免疫调节等作用。柯德森等[24]利用不同方式水解乳清蛋白,证明了适当水解(酶法水解时控制水解程度为10~12 mg/mL)能够显著提高乳清蛋白的抗菌能力。高海燕[25]以乳清蛋白水解物作替代氮源(全替代)研究其在乳酸菌培养基中的应用,结果表明,对于嗜热链球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌以及双歧杆菌,全替代培养基的菌密度、活菌数以及生长趋势优于或接近于市售乳酸细菌培养基(MRS培养基)。
蛋清蛋白肽除具有以上功能特性外,还具有抗菌、减肥、降脂、抗疲劳等作用。鸡蛋溶菌酶本身作为一种蛋白质而具有免疫原性,但在非酸性条件下的热稳定性极差。朱伶俐[26]以鸡蛋溶菌酶为原料制备了溶菌酶抗菌肽,结果显示,当水解度为5.46%时,经115 ℃、20 min热处理后的抑菌率为53.6%。王璐[27]以鸡蛋清为原料,通过酶解制备生物活性肽并对其进行减肥功能评价。结果表明,蛋清蛋白肽具有一定的减肥、降脂作用,且随着多肽含量的增多,减肥、降脂作用增强。王玉等[28]研究了鸡蛋清水解物(HEpep)对斑马鱼的疲劳改善作用,结果表明,HEpep对亚硫酸钠诱发的疲劳斑马鱼运动能力有明显的改善作用,可以显著性降低斑马鱼体内乳酸含量。
2.6鸡蛋清蛋白肽与乳清蛋白肽的协同作用协同作用是活性物质之间的一种常见反应,尤其是食品,其成分复杂、体系多样,不同成分之间可能存在一定的协同作用。饶胜其等[29]将乳清蛋白酶解液MWPH和鸡蛋清蛋白酶解液 EWPH以及相应粗分离组分M_Fs和E_Fs分别进行两两复配,结合联合指数CI值分析,结果表明酶解液MWPH和EWPH具有显著的协同还原能力,而粗分离组分M_Fs和E_Fs具有显著的协同还原能力以及协同清除DPPH自由基和羟自由基的能力。此外,胡晓赟[30]利用纯肽研究小肽与其他抗氧化成分之间的协同作用,结果发现,VC与7种小肽发生协同增效作用,使ABTS自由基清除能力提高。