一种疏肝养血健脾复方中药颗粒的研制

摘要  [目的]优化疏肝养血健脾复方中药颗粒制剂的生产工艺。[方法]采用单因素试验优化挥发油提取工艺及参数。以总芍药苷含量、固形物含量为指标，采用正交试验优化中药提取工艺。[结果]挥发油最佳提取工艺为加水量为8倍药材重量、浸泡1.5 h、水蒸气蒸馏提取6 h。中药最佳提取工艺为10倍水煎煮2次，每次2 h。[结论]该提取工艺提取效率高、工艺简单、稳定性高，适合大规模生产。

关键词 疏肝养血;健脾;复方;中药颗粒;研制

中图分类号 R 285  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2022）16-0123-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.16.032

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Preparation of a Compound Traditional Chinese Medicine Granule for Soothing Liver， Nourishing Blood and Strengthening Spleen

TAO Gang1，2，TU Hong-jian1，2，FENG Xu-guang1，2 et al

（1.Ningbo Yufangtang Biotechnology Co.，Ltd.，Ningbo，Zhejiang 315012;2. Yufangtang Key Agricultural Enterprise Research Institute of Natural Health Products，Ningbo，Zhejiang 315012）

Abstract [Objective]To optimize the production process of a compound traditional Chinese medicine granule for soothing liver， nourishing blood and strengthening spleen.[Method]The extraction process and parameters of volatile oil were optimized by single factor experimental design. Taking the contents of total paeoniflorin and solid as indexes， the extraction process of traditional Chinese medicine was optimized by orthogonal experiment. [Result]The optimal extraction process of volatile oil was adding water 8 times the weight of medicinal materials， soaking for 1.5 hours， and extracting by steam distillation for 6 hours.The optimal extraction process of traditional Chinese medicine was 10 times water decoction for 2 times，2 h each time.[Conclusion]The established process has high extraction efficiency， simple process and high stability， which is suitable for large-scale production.

Key words Soothing liver and nourishing blood;Strengthening spleen;Compound;Chinese medicine granule;Development

脾与肝是人体重要脏器，肝为藏血之脏[1]，性喜条达而主疏泄，脾虚气弱则统血无权，肝郁血虚[2]则疏泄不利。肝脾是调节气血的枢纽[3]，也是其他脏腑维持正常功能的关键。气血是构成生命的基本物质，气血冲和是健康的前提[4]。传统中医药理论认为肝郁血虚脾弱主病位在肝脾，由肝脾虚弱导致脏器运行不畅、功能失调[5]，宜采用“急则治肝，缓则治脾，肝脾同治”及“以调代补”之法。

疏肝养血健脾颗粒参考中医药经典古方《太平惠民和剂局方》中逍遥散，经配方优化工艺升级而成复方中药颗粒剂，具有疏肝、养血、健脾的功效。该方由柴胡、当归、白芍、白术、干姜、薄荷、炙甘草、熟地黄、茯苓共9味药材经典复配。该研究基于传统中医药制剂经验，采用新时代制剂工艺创新成果，结合复方中药特殊性质，对制剂工艺进行了优化升级，拟定工艺为茯苓粉碎，当归、白术、干姜、薄荷蒸馏成挥发油，为防止挥发油氧化、挥发甚至失效[6]，故用γ-环状糊精进行包埋，药渣与柴胡、白芍、炙甘草、熟地黄4味药材饮片混合水提[7]，浓缩喷雾后与茯苓粉混合后乙醇制粒，低温烘干再与挥发油包埋粉混合均匀后灌装，通过试验优化该中药制剂加工工艺。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 主要试材。当归、白术、干姜、薄荷、柴胡、白芍、炙甘草、熟地黄、茯苓饮片均购自安徽朱氏康豪中药饮片有限公司;γ-环状糊精（瓦克化学）;芍药苷对照品（购自中国食品药品检定研究院）。

1.1.2 主要试剂。甲醇、乙腈（色谱纯）;三乙胺（分析纯）;磷酸（优级纯）。

1.1.3 主要仪器。数显恒温水浴锅;Agilent HPLC-1260;鼓风干燥箱;超声波清洗器;低速离心机;喷雾干燥机;粉碎机。

1.2 试验方法

1.2.1 产品质量控制测定方法。理化、重金属、农药残留：GB 5009.3—2016、GB 5009.4—2016、GB 5009.11—2014、GB 5009.12—2017、GB 5009.17—2014、GB/T 5009.19—2008;粗多糖：硫酸-苯酚法[8];微生物指标：GB 4789.2—2016、GB 4789.3—2016、GB 4789.4—2016、GB 4789.10—2016、GB 4789.15—2016;芍药苷：《中华人民共和国药典》一部白芍项下（2020年版）。

1.2.2 挥发油提取工艺。为确定该中药制剂中挥发油制备工艺，以加水量、浸泡时间、提取时间为考察的三因素。采用单因素试验，以挥发油提取率作为参考指标，优选当归、白术、干姜、薄荷的挥发油提取工艺。挥发油提取率=挥发油体积（mL）/含油药材质量（g）×100%。

1.2.2.1 加水量考察。按配方比例称取4份当归、白术、干姜、薄荷，每份80 g，粉碎后置2 L圆底烧瓶中，分别加入药材量6、8、10、12倍水，浸泡1.5 h，水蒸气蒸馏提取6 h，收集挥发油并计算提取率。

1.2.2.2 浸泡时间考察。按照配方比例称取5份当归、白术、干姜、薄荷，每份80 g，粉碎后置于2 L圆底烧瓶中，加药材量8倍水，分别浸泡0、0.5、1.0、1.5、2.0 h，水蒸气蒸馏提取6 h，收集挥发油并计算提取率。

1.2.2.3 提取时间考察。按照配方比例称取4份当归、白术、干姜、薄荷，每份80 g，粉碎后置于2 L圆底烧瓶中，加药材量8倍水浸泡1.5 h，水蒸气蒸馏提取4、5、6、7 h，收集挥发油并计算提取率。

1.2.2.4 挥发油提取工艺的验证。按试验中确定的最佳条件验证3批次。

1.2.3 固形物含量的测定。精密称取稀浸膏浓缩液样品25 g，置于干燥至恒重且已称重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥箱干燥4 h，干燥器中冷却30 min，精密称定。以干燥品计算供试品中固形物含量，公式为w=（m 2-m 3）×V/m 1，式中，w为浸膏固形物含量（g）;m 1为浸膏供试品称取质量（g）;m 2为干燥后供试品蒸发皿总质量（g）;m 3为恒重后蒸发皿质量（g）;V为定容体积。

1.2.4 芍药苷的含量测定。

1.2.4.1 色谱条件。色谱柱Agilent SB-C 18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺（14∶86∶0.05）;流速1.0 mL/min;检测波长230 nm;柱温38 ℃;进样量10 μL。

1.2.4.2 对照品溶液制备。精密称取芍药苷对照品，加50%甲醇溶解定容至100 mL，得对照品溶液。

1.2.4.3 试样处理。精密称取0.5 g试样，加50%甲醇定容至25 mL，密塞称重，超声处理30 min（功率150 W，频率60 kHz），冷却至室温并称重，用50%甲醇补足减少的重量，摇匀后滤过，取续滤液即得。

1.2.4.4 标准曲线绘制。按照“1.2.4.2”制备对照品溶液，分别精密称取浓度为40.53 μg/mL的对照品溶液0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 μL以及浓度为0.135 1 mg/mL的对照品溶液5.0、10.0、15.0 μL，注入HPLC中，测定芍药苷峰面积，以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程为Y=952.48X+36.033，R2=0.997 1（n=8），线性范围为0.023～2.027 μg。

1.2.4.5 含量测定。精密吸取“1.2.4.3”试样溶液10 μL注入HPLC中，按“1.2.4.1”色谱条件测定，以峰面积计算芍药苷含量。

1.2.5 中药提取工艺研究。

1.2.5.1 正交试验设计方法。按配方比例称取柴胡、白芍、炙甘草、熟地黄饮片与同配方量当归、白术、干姜、薄荷蒸馏萃取挥发油后残渣9份，每份合计200 g，按L 9（34）正交试验表安排工艺试验，提取、过滤、浓缩、定容至250 mL得稀浸膏，分别测量稀浸膏中芍药苷及固形物含量。

1.2.5.2 工艺优化。采用正交试验设计，以白芍中芍药苷含量和浸膏固形物含量为评价指标，选择提取次数、加水量、提取时间[9]这3个影响芍药苷和固形物含量的主要因素进行考察[10]，每因素3个水平，优选中药最佳提取工艺。

以综合评分为考察指标，采用加权综合评分法，以芍药苷和固形物含量9次试验最大值为100分，将指标芍药苷和固形物总量转换为评分值，固形物含量加权系数为0.60，芍药苷总量系数为0.40，综合评价筛选最佳工艺。

1.2.5.3 最佳提取工艺验证。柴胡、白芍、炙甘草、熟地黄、当归、白术均含多糖成分，白芍含大量芍药苷，因此确定该制剂的功效成分为粗多糖、芍药苷。水和50%（V/V）浓度以下的乙醇溶液对多糖提取效果好。芍药苷提取多采用煎煮法和醇提回流法，煎煮法得到浸膏量较多、溶出效果好，乙醇回流法提取芍药苷含量高。但本品为复方制剂，各原料配伍综合起效，因此提取条件不能简单以芍药苷提取量确定。水提取法简单、经济，符合中药传统食用方法，醇提取法会损失大量有益多糖，因此本品采用水提取法结合试验筛选，称取配方比例药材及蒸馏药渣3份，每份200 g，按优选提取工艺进行3次验证试验，浓缩定容，测定芍药苷、固形物总量并计算综合评分。

1.2.6 喷雾干燥工艺考察。根据设备情况，优选中药浓缩液干燥方法为喷雾干燥，在设备干燥条件（进风温度、出风温度）相对固定基础上，浓缩液不同密度对喷干效果影响较大，试验以喷干粉状态及塔内挂壁情况为综合评价指标，考察不同密度下浓缩液干燥效果。