QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定六堡茶中15种农药残留

摘 要：建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定六堡茶中15种农药残留的方法。样品经1%乙酸水浸泡，再加乙腈提取，加入无水乙酸钠和无水硫酸镁使有机相和水相分层，去除水分，采用PSA、C18、GCB、MgSO4混合净化管净化后，以超高效液相色谱-串联质谱法定性定量分析。结果表明，15种农药化合物的线性相关系数均大于0.995 9，检出限为0.02～0.20 mg·kg-1，定量限为0.04～0.40 mg·kg-1，在3个加标回收水平下，平均回收率在63.1%～113.0%，相对标准偏差为0.1%～8.6%。该方法检测速度快，操作简单，有较好的灵敏度，适用于六堡茶中农药残留的测定。

关键词：QuEChERS；超高效液相色谱-串联质谱法；农药残留；六堡茶

Quick Determination of 15 Pesticide Residues in Liupao Tea by QuEChERS UltraHigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

CHEN Maolin， XIAO Jiayin*， DAI Yonghai

（Wuzhou Food and Drug Inspection Institute， Wuzhou 543000， China）

Abstract： A method was developed for the rapid determination of 15 pesticide residues in Liupao tea by QuEChERS-ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS）. The samples were soaked in 1% acetic acid water， then extracted with acetonitrile， and anhydrous sodium acetate and anhydrous magnesium sulfate were added to make the organic and aqueous phases stratified， and the water was removed， and the samples were purified by a mixture of purification tubes of PSA， C18， GCB， and MgSO4， and then analyzed by UPLC-MS/MS. The results showed that the linear correlation coefficients of the 15 pesticide compounds were more than

0.995 9， the limits of detection were in the range of 0.02～0.20  mg·kg-1， the limits of quantification were in the range of 0.04～0.40 mg·kg-1， and the average recoveries were in the range of 63.1%～113.0% at three spiked recoveries levels with the relative standard deviations of 0.1%～8.6%. The method is fast， simple and has good sensitivity， and is suitable for the determination of pesticide residues in Liupao tea.

Keywords： QuEChERS; ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; pesticide residues; Liupao tea

六堡茶富含茶多酚﹑黄酮等营养物质，具有明目清心﹑降低胆固醇等保健功效[1]。在六堡茶的种植过程中，农药被广泛使用。目前，我国农药残留检测水平与发达国家相比仍有一定的差距[2]。为确保六堡茶的质量安全，本文拟建立快速、准确检测六堡茶中农药残留的方法，以提高检测效率[3]。QuEChERS是目前农产品检测的主流方法，净化效果好，具有简便、快速、安全、高效等优点[4]。本文以QuEChERS为净化手段，采用超高效液相色谱-串联质谱法（Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）对六堡茶中农药残留进行快速筛查和定量分析[5]。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

旋涡混合器：上海青浦泸西仪器厂；LC-1290/QQQ-6470超高效液相色谱质谱联用仪：安捷伦科技有限公司；Allegra X-15R离心机：美国贝克曼公司；圆周振荡摇床：IKA公司。

无水硫酸镁和无水乙酸钠：四川西陇科学有限公司；乙腈（HPLC级）：OMNICHEM；PSA、GCB和C18：上海安谱实验科技股份有限公司；涕灭威亚砜、涕灭威砜、氯吡脲、啶虫脒、涕灭威、苯醚甲环唑、三羟基克百威、克百威、甲基异柳磷、多菌灵、吡虫啉、水胺硫磷、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、嘧菌酯和腈菌唑15种农药标准品：购自TMstandard公司。

1.2 农药标准溶液配制

分别精密称取15种农药标准品约10.00 mg于15个10 mL容量瓶中，加少量乙腈，超声溶解，用乙腈定容至刻度，配制成浓度约为1.0 mg·mL-1的15种农药单标储备液，储存于-20 ℃冰箱中。

1.3 试验方法

1.3.1 提取及净化

称取2 g（精度到0.01 g）试样于50 mL聚丙烯离心管中，加入10 mL 1%乙酸水浸泡10 min，加入15 mL乙腈，置于振荡摇床振荡5 min，加入混合盐包（1.5 g无水乙酸钠和6 g无水硫酸镁），立即摇匀，冰浴10 min，冷却后再振荡5 min，4 750 r·min-1离心5 min，取上清液3 mL过QuEChERS净化管（PSA 100 mg，C18 100mg，GCB 30 mg，MgSO4 300 mg）净化，弃去初滤液，续滤液过0.22 μm有机滤膜，供UPLC-MS/MS测定。

1.3.2 色谱条件

色谱柱：ACE Ultracore Super C18（75 mm×2.1 mm，2.5 μm）；流动相：A为0.1%甲酸水，B为乙腈。梯度洗脱程序：0～0.5 min，5%B；0.5～2.0 min，5%B→80%B；2.0～2.5 min，80%B→90%B；2.5～4.0 min，90%B。后运行时间：1.5 min；流速：0.35 mL·min-1。柱温：40 ℃。进样量：1.0 μL。

1.3.3 质谱条件

离子源：AJS ESI+；检测方式：MRM；雾化器压力：15 psi；干燥气温度：150 ℃；干燥气流速：

8 L·min-1；毛细管电压：3 500 V；加速电压：7 V；鞘气温度：350 ℃；鞘气流速：10 L·min-1；15种农药质谱参数如表1所示。

2 结果与分析

2.1 线性关系、检出限与定量限

取1.2中标准储备液分别采用空白六堡茶基质溶液进行稀释，配制6个浓度水平的系列混合标准溶液，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线[6]。如表2所示，在相应样品浓度范围内，15种农药的峰面积与其浓度的线性关系良好（R2＞0.995 9）。以定量离子对的信噪比大于3计算方法的检出限，信噪比大于10计算方法的定量限[7]，各农药的检出限为0.02～0.20 mg·kg-1，定量限为0.04～0.40 mg·kg-1。

2.2 回收率与精密度

选取标准系列的1、3、5共3个浓度水平作为加标水平1、加标水平2、加标水平3，对六堡茶空白试样进行加标回收实验，每个浓度水平设置6个平行，按上述方法同步进行实验，测定15种农药在六堡茶试样中的平均回收率和相对标准偏差，结果如表2所示。15种农药在六堡茶中的平均回收率为63.1%～113.0%，相对标准偏差为0.1%～8.6%，可见该方法符合农药残留痕量分析的要求[8]。

3 结论

本文通过QuEChERS对六堡茶中农药残留进行前处理净化，用UHPLC-MS/MS检测[9]，建立测定六堡茶中农药残留的方法。结果表明，QuEChERS净化效果良好，该方法操作简便、快速、安全、高效，可作为六堡茶中15种农药残留的检测分析方法。

参考文献

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[2]许祯毅，姜咸彪.茶叶中农药残留检测技术应用进展[J].福建茶叶，2020，42（5）：8-10.

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[4]范兴，刘华文，廖璐，等.高效液相色谱—质谱串联法测定六堡茶农药残留[J].广西职业技术学院学报，2023，16（3）：83-90.

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[6]吴汉彬.QuEChERS-气相色谱串联质谱法同时测定茶叶中6种农药残留[J].食品与机械，2023，39（6）：55-58.

[7]刘伟悦.超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中三种农药残留[J].食品工业，2022，43（7）：307-311.

[8]刘相真，叶美君，陆小磊.GC-MS和LC-MSMS法快速测定茶叶中35种农药残留[J].中国茶叶加工，2019（3）：48-58.

[9]胡沛然.六堡茶多酚氧化酶及其产生菌对茶叶品质的应用[D].南宁：广西大学，2019.

作者简介：陈茂林（1994—），男，广西梧州人，本科，助理工程师。研究方向：食品、药品检测。

通信作者：肖嘉茵（1994—），女，广西梧州人，本科，工程师。研究方向：食品、药品检测。E-mail：931655229@qq.com。