气相色谱-质谱法测定鸡肉中多种农药残留

摘 要：目的：建立气相色谱-质谱法测定鸡肉中15种农药残留的方法。方法：样品经乙腈提取，凝胶色谱仪净化，SH-RXi-5Sil MS毛细管柱分离，气相色谱-质谱法检测，内标法定量。结果：15种农药残留在0.04～2.00 μg·mL-1线性关系良好，相关系数R2均大于0.998。方法检出限为0.002 0～0.008 6 mg·kg-1，定量限为0.005 6～0.018 0 mg·kg-1，加标回收率为76.4%～93.5%，相对标准偏差为0.4%～9.3%。结论：该方法准确度高、精密度好，适用于同时测定鸡肉中多种农药残留。

关键词：农药残留；鸡肉；气相色谱-质谱法

Abstract： Objective： To establish a method for the determination of 15 pesticide residues in chicken by gas chromatography-mass spectrometry. Method： The samples were extracted with acetonitrile， cleaned up by gel chromatography， separated by SH-RXi-5Sil MS capillary column， detected by gas chromatography-mass spectrometry， and quantified by internal standard method. Result： The 15 pesticide residues had a good linear relationship in the range of 0.04～2.00 μg·mL-1， and the correlation coefficient R2 was greater than 0.998. The detection limit of the method was 0.002 0～0.008 6 mg·kg-1， the limit of quantification was 0.005 6～0.018 0 mg·kg-1， the spiked recovery was 76.4%～93.5%， and the relative standard deviation was 0.4%～9.3%. Conclusion： This method has high accuracy and good precision， and is suitable for the simultaneous determination of multiple pesticide residues in chicken.

Keywords： pesticide residue; chicken; gas chromatography-mass spectrometry

不当使用农药产生的农药残留及其代谢物会通过食物链传递给动物，对人体健康构成潜在威胁。气相色谱-质谱法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）适用于动物源性农药残留的检测，且检测结果相比于气相色谱法更加精确[1]。

在测定肉鸡中农药残留时，油脂、蛋白质等杂质干扰较大，且会污染进样口及色谱柱。基于此，本文通过凝胶渗透色谱仪去除油脂、色素等大分子物质[2-5]，采用气相色谱-质谱联用仪测定。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

TQ8040气质联用仪，岛津；J2 Preplinc Platform凝胶色谱仪，北京普利泰；420R冷冻高速离心机，Hettich；heidolph自动涡旋混合器，海道夫；TXB622L电子天平，SHIMADZU；RA8旋转蒸发仪，海道夫。

乙腈、丙酮、环己烷、乙酸乙酯，均为色谱纯；氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾，均为分析纯；NaCl饱和2 mmol·L-1磷酸缓冲溶液；15种农药对照品标准溶液和环氧七氯B（100 μg·mL-1）标准溶液，均来源于农业农村部环境保护科研监测所。

1.2 实验方法

1.2.1 样品的制备及保存

随机取新鲜的鸡胸肉样品切成小块，用高速绞肉机均质混匀，置于-18 ℃条件下保存。

1.2.2 样品前处理

（1）提取。准确称取5.00 g样品，置于50 mL离心管中，加入5 mL纯水，均质混匀5 min，加入20 mL乙腈，4 g氯化钠，均质混匀6 min，取上清液10 mL，用NaCl饱和2 mmol·L-1磷酸缓冲溶液调pH值至中性，在40 ℃水浴条件下旋转浓缩至近干，加入10 mL乙酸乙酯-环己烷（1∶1，V/V）复溶，作为待净化液。

（2）净化。取上述待净化液置于凝胶色谱仪（Gel Permeation Chromatography，GPC）上净化，以乙酸乙酯-环己烷（1∶1，V/V）为流动相，控制流速为5 mL·min-1，收集15～25 min时间段的洗脱液于鸡心瓶中，在40 ℃水浴条件下旋转浓缩至近干，加入2 mL丙酮溶液复溶，加入40 μL内标溶液，过0.22 μm微孔滤膜，用于气相色谱-质谱测定，内标法定量。

1.2.3 仪器条件

（1）色谱条件。色谱柱：SH-RXi-5Sil MS毛细管柱（30.0 m×0.25 mm，0.25 μm）；进样口温度：280 ℃；进样量：1 μL；进样方式：不分流进样。柱温箱升温程序：初始温度60 ℃，保持1 min；25 ℃·min-1升温至210 ℃，保持3 min；30 ℃·min-1升温至300 ℃，保持3 min。

（2）质谱条件。接口温度：280 ℃；离子源温度：280 ℃；电子轰击源：70 eV；溶剂延迟时间：3 min；扫描模式：多反应监测；其他质谱参数见表1。

1.2.4 标准工作曲线的绘制

将15种农药对照品溶液用丙酮配制成浓度为10 μg·mL-1的混合标准储备液，将环氧七氯B配制成浓度为5 μg·mL-1的内标溶液。将混合标准储备液用丙酮进一步稀释配制成浓度为0.04 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1、1.00 μg·mL-1和2.00 μg·mL-1的标准系列溶液（现配现用），按标准溶液定容体积，加入5 μg·mL-1的环氧七氯B内标溶液，使标准溶液内标浓度为0.1 μg·mL-1，配制标准工作曲线。

2 结果与分析

2.1 样品前处理条件优化

2.1.1 提取溶剂的选择

通过实验考察乙腈与丙酮的提取效果，发现丙酮与水有较好的互溶性，旋蒸步骤较难蒸干，只能旋蒸过后采用氮吹至近干，由于步骤烦琐，吹干时间过长，导致回收率仅为31.7%～52.9%；乙腈提取的回收率可达到78.3%～99.4%。因此，本次实验采用乙腈作为提取溶剂。

2.1.2 净化方法的选择

本次实验考察了仅用SPE净化柱净化、用GPC仪净化后再用石墨化碳黑-氨基复合固相萃取柱净化、仅用GPC净化后就用丙酮复溶的提取效果。结果显示，用GPC仪净化后再用石墨化碳黑-氨基复合固相萃取柱净化的回收率为42.4%～54.6%，仅用SPE净化柱净化的回收率为39.6%～50.9%，仅用GPC仪净化的回收率为83.6%～101.2%。因此，本次实验采用GPC仪净化后直接用丙酮复溶上机测定。

2.2 线性范围、检出限及定量限

如表2所示，各种农药在0.04～2.00 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好，相关系数R2均大于0.998。稀释混合标准溶液添加到样品，按上述方法进行检测，按信噪比为3确定检出限，信噪比为10确定为定量限。经多次实验，得到15种农药残留的方法检出限为0.002 0～0.008 6 mg·kg-1，方法定量限为0.005 6～0.0180 mg·kg-1。

2.3 回收率和精密度

准确称取5.00 g空白鸡肉9份，分别置于50 mL离心管中，分别添加浓度为0.2 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1的混合标准工作液，每个浓度点做3个样，用于GC-MS测定，计算回收率，结果见表3。加标回收率为76.4%～93.5%，相对标准偏差为0.4%～9.3%，满足实验标准要求。

2.4 样品检测结果

在百色市各农贸市场随机抽取50份鸡肉样品，采用本实验方法进行15种农药残留检测。结果显示，有1批样品检出氟虫腈，检出结果为0.012 mg·kg-1；有1批样品检出毒死蜱，检出结果为0.007 8 mg·kg-1；其余48批均未检出农药残留。

3 结论

通过改进提取方法，有效去除样品多余杂质，减少对目标物的干扰，本文建立了气相色谱-质谱法测定鸡肉中15种农药残留的方法。该方法具有样品前处理过程操作简单、灵敏度高等特点，回收率及精密度均能达到日常检测的基本要求，适用于肉鸡中多种常见农药残留的检测。

参考文献

[1]刘润珠，王松，崔鹤，等.牛肉和猪肉基质中多农药残留GCMS分析方法[J].食品研究与开发，2013，34（22）：25-28.

[2]韦凤栖，莫静波.食品中农药残留检测的样品前处理技术进展[J].中国卫生检验杂志，2012，22（3）：678-680.

[3]李君君，李力军，徐惠诚，等.动物源性食品中农药多残留检测前处理技术研究进展[J].中国食品卫生杂志，2012，24（4）：403-407.

[4]赵秋，郑志雯，张峥，等.气相色谱法测定鱼和肉中有机磷农药残留量[J].理化检验（化学分册），2004（3）：150-152.

[5]杰夫，初春.凝胶色谱净化系统用于测定牛肉样品中有机氯农药残留[C]//西北地区第七届色谱学术报告会甘肃省第十二届色谱年会论文集.兰州：甘青宁色谱协作中心，2012：204-206.

作者简介：黄彩凤（1984—），女，壮族，广西百色人，在职硕士，主管药师。研究方向：食品药品检验。

通信作者：王双娄（1994—），女，壮族，云南广南人，本科。研究方向：食品检验。E-mail： 851235233@qq.com。