高效液相色谱法快速测定保健品中6种人参皂苷的含量

摘 要：目的：快速高效检测非人参及其加工品为主要原料的保健品中6种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1的含量。方法：以75%甲醇为提取剂超声提取，采用高效液相色谱法测定。结果：6种人参皂苷在0.1～1.0 mg·mL-1线性关系良好；人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1在阿拉伯糖粉中的加标回收率分别为93.1%、95.3%、94.8%、94.1%、98.6%和93.9%；在力保健牛磺酸功能饮料中的加标回收率分别为90.8%、94.6%、93.0%、91.7%、98.0%和92.1%；在蜂胶软胶囊中的加标回收率分别为91.1%、95.0%、92.3%、92.7%、98.4%和92.5%。结论：本法能快速高效提取并测定非人参及其加工制品为主要材料的保健品中6种人参皂苷的含量。

关键词：保健品；人参皂苷；液相色谱

Rapid Determination of Six Ginsenosides in Health Products by HPLC

JU Guanglin

（Fujian Inspection and Research Institute for Product Quality， Fuzhou 350002， China）

Abstract： Objective： To quickly and efficiently detect the content of six ginsenosides Rb1， Rb2， Rc， Rd， Re， and Rg1 in health products mainly made from non ginseng and its processed products. Method： The extracts were ultrasonically extracted with 75% methanol as the extractant and determined by high performance liquid chromatography （HPLC）. Result： The six ginsenosides exhibited good linear relationships within the range of

0.1 mg·mL-1 to 1.0 mg·mL-1; the recovery rates of ginsenosides Rb1， Rb2， Rc， Rd， Re， and Rg1 in arabinose powder were 93.1%， 95.3%， 94.8%， 94.1%， 98.6%， and 93.9%; the recovery rates of Lipovitan taurine functional beverages were 90.8%， 94.6%， 93.0%， 91.7%， 98.0%， and 92.1%; the recovery rates of propolis soft capsules were 91.1%， 95.0%， 92.3%， 92.7%， 98.4%， and 92.5%. Conclusion： This method can quickly and efficiently extract and determine the content of six ginsenosides in health products mainly made from non ginseng and its processed products the main materials.

Keywords： health products; ginsenoside; high performance liquid chromatography

人参皂苷是人参、西洋参等人参属植物中被证实具有增强体质、调节神经、延缓衰老及抗肿瘤等功效的有效成分[1-2]。其中人参皂苷Rg1具有调节神经系统、保护神经元细胞的作用[3]；人参皂苷Rb1具有促进神经修复，减少神经元损伤的作用[4]；人参皂苷Re具有抑制胰岛素抵抗、调节脂质代谢、抗炎的作用[5]；人参皂苷Rd有抗氧化作用[3]；人参皂苷Rb2具有降脂降糖、调节心血管系统、维持心脏和血管正常生理功能的作用[6]；人参皂苷Rc有抗氧化和抗炎作用[7]。本实验以3种保健品基质为研究对象，参照《保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则（2020年版）》应用高效液相色谱法建立了快速稳定高效检测以非人参及其加工品为主要原料的保健品中6种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1含量的方法[8]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

唐传牌阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料、汤臣倍健蜂胶软胶囊，购自市场。

人参皂苷Rb2（批号CCPE900007，纯度96.0%）、人参皂苷Rc（批号CCPE900217，纯度95.6%）、人参皂苷Rd（批号CCPE900216，纯度95.3%）、人参皂苷Re（批号CCPE901307，纯度98.7%）和人参皂苷Rg1（批号CCPE900 214，纯度94.9%），均购自广州佳途科技股份有限公司；人参皂苷Rb1（批号1ST400 41，纯度98.7%），购自天津阿尔塔科技有限公司；甲醇（分析纯）、乙腈（色谱纯），购自山东禹王化学试剂有限公司；水为自制超纯水。

1.2 仪器与设备

D3200高效液相色谱仪，大连依利特分析仪器有限公司；KQ-500DE数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；ME204电子天平，梅特勒托利多仪器有限公司；超纯水机，美国密理博公司；多位平行浓缩仪，睿科集团（厦门）股份有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 溶液的制备

标准品储备溶液的配制：称取人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1标准品于同一容量瓶中，用甲醇配制成各组分浓度为9.92 mg·mL-1、

10.3 mg·mL-1、9.54 mg·mL-1、9.59 mg·mL-1、

9.84 mg·mL-1和9.94 mg·mL-1的标准品储备溶液。

标准系列溶液配制：精密量取标准品储备液

1.0 mL、2.0 mL、2.0 mL、2.0 mL和1.0 mL，置于100 mL、100 mL、50 mL、25 mL和10 mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，即配成人参皂苷标准系列溶液。人参皂苷标准系列溶液配制浓度如表1所示。

唐传牌阿拉伯糖粉和力保健牛磺酸功能饮料样品溶液的制备：称取样品5 g，置于50 mL容量瓶中，加入20 mL水溶解，超声提取15 min后，加20 mL甲醇继续超声提取15 min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，离心，取10 mL上清液，氮吹浓缩至1 mL即得样品溶液。

蜂胶软胶囊样品溶液的制备：按上述方法取内容物进行供试品溶液的制备。

1.3.2 色谱系统条件

色谱柱：依利特Hypersil 300Ǻ C18（250 mm×

4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水，洗脱程序见表2；检测波长：203 nm；柱温：35 ℃；流速：

1.0 mL·min-1；进样量：10 μL。

2 结果与分析

2.1 液相色谱图

按1.3.2色谱系统条件分析人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1浓度为992.0 μg·mL-1、

1 030.0 μg·mL-1、954.0 μg·mL-1、959.0 μg·mL-1、984.0 μg·mL-1和994.0 μg·mL-1时的标准溶液，基线分离较好。液相色谱图见图1。

2.2 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1的线性范围

取1.3.1配制的人参皂苷标准系列溶液10 μL进高效液相色谱分析，以人参皂苷浓度（μg·mL-1）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，结果见表3。

2.3 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1的回收率

称取供试样品各2份，按1.3.1方法制备样品溶液测定6种人参皂苷含量，结果表明阿拉伯糖粉、力保健牛磺酸功能饮料及蜂胶软胶囊均不含被测组分。称取5.031 2 g、5.041 2 g、5.036 4 g、5.112 4 g、5.095 4 g、5.038 7 g、5.098 3 g、5.064 4 g和5.046 1 g共9份阿拉伯糖粉，称取5.112 4 g、5.064 2 g、5.310 2 g、5.142 1 g、5.010 6 g、5.065 4 g、5.041 5 g、5.210 4 g和5.009 4 g共9份力保健牛磺酸功能饮料，称取5.048 9 g、5.210 5 g、5.131 5 g、5.198 2 g、5.176 6 g、5.077 8 g、5.210 6 g、5.116 2 g和5.130 2 g共9份蜂胶软胶囊内容物，分成3组分别加入标准品储备溶液30 μL、80 μL、200 μL，按1.3.1方法制备样品溶液，按1.3.2色谱条件进行测定，结果见表4～表6。结果表明该实验方法有较好的回收率和精密度，回收率为82.9%～109.2%，精密度为4.0%～8.3%。

3 结论

越来越多的年轻人开始重视中医理疗养生，关注养生，因此向保健品中添加人参提取物成为趋势。本实验采用高效液相色谱法测定了保健品中6种人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re和Rg1的含量，为保健品质量检测提供了方法参考。

参考文献

[1]赵方杰.陕西留坝西洋参连作障碍成因及消减措施初步研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2020.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2020.

[3]李冬，王欣笛，郭道宇，等.人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Re和帕金森病的研究进展[J].解剖学杂志，2020，43（6）：517-521.

[4]黄浩宸，赵婉婷，郭䱟昫，等.人参皂苷Rb1在治疗缺血性卒中作用机制的研究进展[J].北京医学，2022，44（5）：456-460.

[5]张金山，刘艳，权海燕，等.人参皂苷Re对非酒精性脂肪肝病治疗作用的研究进展[J].中华中医药学刊，2022，40（3）：155-159.

[6]孙光芝，王继彦，刘志，等.人参皂苷Rb2的药理学研究概况[J].吉林农业大学学报，2005（3）：299-305.

[7]宋文浩.人参皂苷Rc减轻心肌缺血损伤作用及机制研究[D].烟台：烟台大学，2023.

[8]国家市场监督管理总局.保健食品理化及卫生指标检验与评价技术指导原则（2020年版）[EB/OL].（2020-10-16）[2023-08-19].https：//www.samr.gov.cn/zw/zfxxgk/fdzdgknr/tssps/art/2023/art_d0c45ed1dc6d4ff4a7eb6bb9baac0bb1.html.