保健品中非法添加药物的相关分析

摘 要：目的：通过对市售糖尿病人常用的保健品的筛查分析，检测保健品中非法添加降糖药的情况。方法：采用Agela C18色谱柱（250 mm×2.1 mm，5 µm）进行分离，以乙酸铵水溶液和乙腈溶液为流动相，进行梯度洗脱，标准曲线外标法定量。结果：二甲双胍、格列喹酮、格列吡嗪和格列齐特在1～200 µg·mL-1线性关系良好，回收率为80.9%～105.0%，相对偏差均小于4.5%（n=6）。4种药品的检出限为0.5～1.0 g·kg-1，定量限为1.0～4.0 g·kg-1。结论：本研究建立的方法前处理简单，结果准确，适合快速筛查保健品中非法添加降糖药的测定，为保健品和食疗的发展提供了参考。

关键词：糖尿病;保健品;非法添加剂

Correlation Analysis of Illegal Additives in Medical Diet for Diabetes

REN Yuqin

（Gulang County People’s Hospital， Gulang 733100， China）

Abstract： Objective： To detect the illegal addition of commonly used health care products and medicated diet therapy， through the analysis of the situation of illegal additives in medical diet for diabetes patients.Method： The analytes were separated on an Agela C18（250 mm×2.1 mm， 5 μm）column， the mobile phase was ammonium acetate-acetonitrile. Four drugs were quantified by matrix standard curve. Result： Metformin， glipizide， glipizide， and gliclazide had a good linear relationship between 1 µg·mL-1 and 200 µg·mL-1， the recoveries were 80.9%～105.0%， and the relative deviations were all less than 4.5%（n=6）. The detection limit of 4 drugs is 0.5～1.0 g·kg-1， and the quantification limit is 1.0～4.0 g·kg-1. Conclusion： The established method is simple， accurate and selective， and is suitable for the determination of 4 drugs in infant food and dietary supplements.

Keywords： diabetes; health medicated diet; illegal additives

随着社会的发展，越来越多的人关注保健，在生活中也常服用保健品。有很多不法商人在保健品中会非法添加具有降糖作用的药物达到降糖效果，从而夸大其保健疗效。目前，有很多方法用于检测非法添加降糖药，如薄层色谱法[1-4]、高效液相法[5-9]、液质法[10-14]、毛细管电泳法[15-16]、近红外光谱法[17]和拉曼光谱法[18]。本实验采用高效液相色谱法对市售的糖尿病人用的食疗包、保健品进行筛查，检测其中是否含有二甲双胍、格列吡嗪、格列齐特和格列喹酮降糖药，本方法快速简单，结果准确，可以用于保健品中非法添加降糖药的快速筛查。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

样品：降糖茶、降糖食疗包和苦瓜洋参胶囊等降糖保健品20批次，均为市售。

试剂：二甲双胍、格列喹酮、格列吡嗪和格列齐特标准品，购于中国药品生物制品检定所;甲醇、乙腈（色谱纯），美国Mreda公司;正己烷、乙酸铵、乙酸（色谱纯），美国Fisher Scientific公司;水为超纯水。

1.2 仪器设备

高效液相色谱仪，美国安捷伦公司;配有二极管检测器（DAD）;MS1003S电子分析天平，瑞士Mettler Toledo公司;Milli-Q超纯水仪，美国Millipore公司;IKA-RV10真空浓缩仪，德国IKA公司。

1.3 实验方法

1.3.1 色谱条件

色谱柱：安杰尔C18色谱柱（250 mm×2.1 mm，5 µm）;柱温：40 ℃;进样量：5 µL;流动相：乙酸铵10 mmol·mL-1水溶液（A）+和乙腈溶液（B）;梯度洗脱程序：0～5 min，20%～80%乙腈（B）;5～20 min，80%乙腈（B）;20 min，20%乙腈（B）;流速：0.8 mL·min-1。

1.3.2 混合标准品溶液配制

准确称取各标准品10 mg，用乙腈溶解，转移至10 mL容量瓶中，定容至刻度，配制成1 000 µg·mL-1混合标准储备液，于-20 ℃以下储存。移取上述标准储备液1 mL，再用乙腈逐级配制成1 µg·mL-1、10 µg·mL-1、50 µg·mL-1、100 µg·mL-1和200 µg·mL-1的系列标准工作液，混合标准品工作液现用现配。

1.3.3 样品处理

取试样适量混匀，研细，称取粉末10 g（准确至0.001 g），置25 mL容量瓶中，加15 mL乙腈超声提取（功率300 W、频率50 kHz）30 min，以8 000 r·min-1离心5 min，取上清有机液，残渣加乙腈溶液重复提取，合并两次有机液，旋转蒸发近干，加1 mL乙腈复溶，过0.45 µm滤膜，备用。

2 结果与分析

2.1 色谱方法的建立

吸取1.3.2项下的混合标准标准工作液100 µg·mL-1，进样10 µL，按照色谱条件进样检测，4种降糖药能够得到很好的分离，且不受其他杂质干扰，色谱图见图1。

2.2 线性关系

以1.3.2项下的系列标准工作液1 µg·mL-1、10 µg·mL-1、50 µg·mL-1、100 µg·mL-1和200 µg·mL-1，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积积分值（Y）为纵坐标，4种药物的浓度（X，µg·mL-1）为横坐标，绘制标准曲线，相关内容详见表1。

2.3 检出限和定量限

在本实验色谱条件下，取混合标准标准工作液100 µg·mL-1稀释后，进高效液相色谱仪分析检测，测定信噪比，取信噪比约为3的溶液浓度作为定性检测限，取信噪比约为10的溶液浓度作为定量检测限。由表1可知，4种药品的检出限为0.5～1.0 g·kg-1，定量限为1.0～4.0 g·kg-1。

2.4 回收率和精密度

取1.3.2项下标准储备液依次加入降糖食疗包空白基质中，配制成浓度分别为1 µg·mL-1、10 µg·mL-1和50 µg·mL-1的加标样品，每个浓度平行实验6次，按照1.3.3项样品处理方法进行实验，计算回收率和精密度，结果见表2。由表2可知，二甲双胍、格列喹酮、格列吡嗪和格列齐特的平均回收率为84.3%～105.0%，相对标准偏差为2.2%～4.3%，方法的准确度、精密度良好。

2.5 样品测定

应用建立的本方法，对市场销售的20批次降糖和食疗降糖保健品进行快速筛查，仅有4批次保健品检出疑似二甲双胍药品，但含量较低且低于检出限，需进一步检测，其他样品中均未检出非法添加降糖药。

3 结论

糖尿病是一种复杂的代谢型疾病，与先天遗传因素或个人的生活习惯、饮食结构、活动方式以及居住环境等有关。

本研究建立的高效液相色谱检测方法可以同时测定食品中非法添加的4种降糖药，具有检测时间短、灵敏度高、准确度可靠的特点，适用于食品中非法添加4种降糖药（二甲双胍、格列吡嗪、格列齐特和格列喹酮）的检测需要。

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