生物制剂对水稻发芽影响及对水稻纹枯病药效试验

摘要 ［目的］探索生物制剂对水稻发芽出苗的影响及对水稻纹枯病的防治效果。选择3种生物制剂和2种化学制剂进行研究。［方法］选择3种生物制剂（5%井冈霉素A可溶液粉剂、20亿孢子/g蜡质芽孢杆菌可湿性粉剂和12%井冈·蜡芽菌水剂）和2种化学制剂（430 g/L戊唑醇悬浮剂和40%苯醚甲环唑悬浮剂）对水稻进行安全性评价，对水稻纹枯病菌室内毒力测定以及大田田间防效试验，研究5种药剂对水稻纹枯病的防治效果，确定田间应用效果。［结果］通过室内毒力测定得出蜡质芽孢杆菌和井冈霉素复配4∶1的增效作用最为明显。室内5种药剂拌种对不同品种水稻3 d的发芽势在49.33%～58.67%，7 d的发芽率在89.00%～93.00%，14 d盆栽试验的出苗率在90.67%～93.33%；各药剂对水稻的发芽和出苗均无影响。12%井冈·蜡芽菌水剂第7天的田间防效为79.61%。430 g/L戊唑醇悬浮剂的田间防效为67.38%，40%苯醚甲环唑悬浮剂的田间防效为68.44%。［结论］生物制剂12%井冈·蜡芽菌水剂在大田试验中能明显提高作物产量，对农业绿色防控技术推广具有重要意义。

关键词 水稻纹枯病;安全性评价;生物制剂;田间药效

中图分类号 S 435.111.4+2  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2024）24-0103-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.24.024

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Effects of Biological Agents on Rice Germination and Efficacy Trials on Rhizoctonia solani

LI Dan-dan1，LI Chang-chun2，FANG Yu1 et al

（1.Hefei Gao'er Life and Health Science Research Institute Co.，Ltd.， Hefei，Anhui  230088;2.Institute of Plant Protection and Agricultural Product Quality and Safety，Anhui Academy of Agricultural Sciences，Hefei， Anhui 230031）

Abstract ［Objective］To investigate the impact of biopesticides on rice germination，seedling emergence，and the control of rice sheath blight.Three biopesticides and two chemical pesticides were selected for exploration.［Method］Three biopesticides （5% jinggangmycin A soluble powder，2 billion spores/gram Bacillus amyloliquefaciens wettable powder，and 12% jinggang-mycobacterium wax bud bacterial water agent） and two chemical pesticides （430 g/L propiconazole suspension concentrate and 40% benodanil suspension concentrate） were chosen for safety assessment，indoor toxicity testing against rice sheath blight pathogens，and field efficacy trials.The aim was to determine the preventive effects of the five agents against rice sheath blight and assess their application efficacy in the field.［Result］Indoor toxicity testing revealed that the synergistic effect of Bacillus amyloliquefaciens and jinggangmycin at a ratio of 4∶1 was most pronounced.In indoor experiments，germination rates for different rice varieties after three days ranged from 49.33% to 58.67%，seven-day germination rates ranged from 89.00% to 93.00%，and seedling emergence rates in the 14-day potted trials varied from 90.67% to 93.33%.It was concluded that none of the tested agents had a significant impact on rice germination and seedling emergence.Field trials for controlling rice sheath blight indicated a seventh-day field efficacy of 79.61% for the 12% jinggang-mycobacterium wax bud bacterial water agent.The field efficacy of a 430 g/L propiconazole suspension concentrate was 67.38%，and a 40% benodanil suspension concentrate showed a field efficacy of 68.44%.［Conclusion］The biopesticide 12% jinggang-mycobacterium wax bud bacterial water agent can significantly increase crop yield in field trials，which is of great significance for the promotion of agricultural green prevention and control technologies.

Key words Rhizoctonia solani;Safety evaluation;Biological agents;Field efficacy

水稻作为我国目前主要的粮食作物之一，分布广泛，种植面积达3.1×107hm2。水稻三大病害［水稻稻瘟病（Piricularia oryzae）、水稻稻曲病（Ustilaginoidea oryae）、水稻纹枯病（Rhizoctonia solani）］，近些年给我国农业生产造成了巨大的经济损失^［1-2］。水稻纹枯病是由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani Kühn）引起的一种土传性真菌病害，该病原菌以菌核的形式在土壤、水稻秸秆中可长期存活越冬，待第二年条件适宜萌发子囊盘释放子囊孢子形成菌丝侵染寄主，近年来水稻的发病情况呈加重趋势^［3］。在我国水稻五大产区水稻病害有不同程度的发生，水稻纹枯病发生较重，纹枯病在早稻、中稻、单晚稻、双晚稻均常年发病，发生面积在90%以上，对水稻高产、稳产构成重大威胁。安徽省水稻种植面积200万hm2左右，年产水稻达100万t^［1，4］。

目前水稻病害发生越来越严重，仍以化学防治为主，农民及种粮大户为了预防水稻病害的加重，导致减产，造成经济损失，对药剂使用量也逐年加大，导致农药残留量也越来越大，利用效率低于30%^［5］。目前对各类病虫害防治以化防为主，农药使用量逐年增加，据联合国粮食及农业组织（Food and Agriculture Organization of the United Nations，FAO）统计，1990—2020年，世界农药总用量整体呈上升趋势^［6］。目前，安徽省农药总产量在20万t以上，在全国农药产量中约占9.0%，使用量位居全国前5，然而，农药制剂的总产量也约30万t，排在全国前3，农药的总产值已超过200亿元^［7］。

农药过量使用对土壤、水、空气等产生危害，对生物和人类的健康造成威胁^［8］。而生物农药防治病虫害因其具有对环境友好、无残留和不易产生抗性等优点，已成为病虫害防治的重要手段之一。但生物农药对病虫害防效不稳定，推广使用速度慢，从20世纪70年代我国推广井冈霉素防治水稻病害以来，到目前为止仅有30%水稻种植户使用生物农药，防效是制约生物农药发展的瓶颈^［9-10］。张清霞等^［11］从7种拮抗菌种筛选出对水稻纹枯病有较强拮抗作用的菌株，如链霉菌（Streptomyces）、假单孢菌（Pseudomonas）和Trichoderma等，微生物的不同种类对病害的防治作用机制不同，生物防治对环境压力较小，对人类安全。周子燕等^［12］通过室内筛选得出多黏类芽孢杆菌与井冈霉素A 7∶3复配对水稻纹枯的增效作用最为明显，田间药效试验也证明该配比对水稻纹枯病的防治效果。因而，提高生物农药防效研究，对我国推广、使用生物农药具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 试验药剂对水稻的安全性评价

参考中华人民共和国农业行业标准《农药对作物性安全评价标准 第1部分：杀菌剂和杀虫剂对作物安全性评价室内试验方法》，试验药剂用量见表1，并设置不含药的对照处理。进行安全性评价，包括水稻的发芽试验及出苗试验。

1.1.1 供试水稻品种及试验药剂。

供试水稻品种为徽两优丝苗（安徽荃银高科种业股份有限公司），绿梗58（安徽绿雨种业股份有限公司），早籼1205（马鞍山神农种业有限责任公司）。

1.1.2 水稻发芽试验。

将不同药剂处理后的种子放阴凉处晾干，培养皿中放入吸水纸，每皿放入100粒水稻种子，再用一层吸水纸放于种子表面，每天喷少量的清水，使种子保持湿润状态。每个处理3个重复，然后放入培养箱内，温度设置在（27±0.5）℃，播种后2、3、4 d，调查发芽数，第7天调查总发芽数及发芽率。

禾谷类种子发芽的标准：正常发育主根长度超过种子长度，幼芽长度超过种子长度1/2。

1.1.3 水稻出苗率试验。

将营养一致的土壤装于φ20 cm×20 cm的花盆中，土壤含水量约60%，各个处理分别播种100粒种子，每个处理3个重复，将水稻种子播种于花盆内平整的土壤表面，在种子上面覆盖一层4 mm左右的细小颗粒，放于室内培养，室温（26.0±0.5）℃，在出苗后14 d记录作物的生长状况和不同药剂处理的出苗率、苗高、根长、根数、鲜重。

1.2 蜡质芽孢杆菌和井冈霉素不同配比对纹枯病菌的毒力测定

1.2.1 供试菌株及试验药剂。

水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani） （安徽省农业科学研究院植物保护与农产品质量安全研究所提供），18%井冈霉素水溶粉剂（安徽丰乐农化有限公司）及蜡质芽孢杆菌（CGMCC：1.10559 市售购买）。

1.2.2 室内毒力测定方法。

2×108 CFU/mL蜡质芽孢杆菌与18%井冈霉素2个单剂先做预备试验，将井冈霉素制剂分别用无菌水按比例稀释成5个系列浓度。经过预备试验，蜡质芽孢杆菌+井冈霉素的混剂分别按照8∶1、4∶1、1∶1、1∶4和1∶8的比例配制混剂母液。将蜡质芽孢杆菌单剂、井冈霉素单剂及不同配比的各浓度药液按照1∶100的比例加入50 ℃左右的PDA培养基中制成含药培养基平板，对照为加相应量的无药溶剂平板。单剂及各配比中的井冈霉素在PDA培养基中的最终梯度浓度为50、100、200、400、800 μg/mL；单剂2×107 CFU/mL蜡质芽孢杆菌在PDA培养基中的最终梯度浓度为20、40、80、160、和320 μg/mL，各配比中的井冈霉素在PDA培养基中的最终梯度浓度以蜡质芽孢杆菌的变化而变化，具体试验配比见表2。按照菌丝生长速率法测定复配药剂毒力。