广西不同产地肉桂6种药效成分HPLC含量测定及评价

摘要 ［目的］利用HPLC测定广西不同产地肉桂6种药效成分含量并进行评价。［方法］利用HPLC方法对广西平南、桂平、岑溪、藤县、东兴、防城等不同产地采集43批次肉桂药材进行药效成分含量测定和评价，并使用SPSS 20.0统计软件进行聚类分析。［结果］方法学考察线性关系、精密度、重复性、稳定性和回收率表现良好；不同批次肉桂药材中6种药效成分含量有一定差异，桂皮醛含量占比最大，岑溪和东兴地区肉桂样品中桂皮醛含量较高，平均含量分别为48.448 3、45.118 1 mg/g，其他产区间桂皮醛平均含量差异较小；各产区肉桂的邻甲氧基肉桂醛和香豆素的含量相差较大，邻甲氧基肉桂醛平均含量最高在桂平产区，为3.022 8 mg/g，平均含量最低产区在防城区，仅为0.380 6 mg/g；2-羟基肉桂醛属于微量、痕量成分，含量在 0.006 0～0.281 6 mg/g。聚类分析发现，43批肉桂药材可以分为2大类，并未呈现地域间的聚类效果。［结论］利用HPLC测定肉桂药效成分方法简单、重现性良好，可用于鉴别不同产地的肉桂，可为广西肉桂最佳产地选择和质量评价提供依据。

关键词 肉桂；HPLC；药效成分；聚类分析

中图分类号 R 284  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2023）16-0167-07

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.16.040

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Determination and Evaluation the Content of Six Medicinal Components in Cinnamon from Different Areas in Guangxi by HPLC

ZHENG Mei-ling1，WEI Yi-ling2，ZHU Qiu-lian3 et al

（1.Guangxi Institute for Food and Drug Control，Nanning，Guangxi 530001;2.Guangxi University of Chinese Medicine， Nanning，Guangxi 530200;3.Yulin Agricultural Products and Agricultural Machinery Safety Inspection Center， Yulin，Guangxi 537516）

Abstract ［Objective］To determine and evaluate the content of six medicinal components of Cinnamomum from different regions in Guangxi by HPLC.［Method］ 43 batches of cinnamon were collected from Pingnan， Guiping， Cenxi， Tengxian， Dongxing and Fangcheng of Guangxi.The HPLC method was used to determine and evaluate the content of medicinal composition and SPSS 20.0 software was used for cluster analysis.［Result］The linear relationship， precision， repeatability， stability and recovery rate of the methodology were good.There were certain differences in the content of six active ingredients in different batches of cinnamon medicinal herbs， with cinnamaldehyde accounting for the largest proportion.The cinnamaldehyde content in cinnamon samples from Cenxi and Dongxing regions was relatively high， with an average content of 48.448 3 and 45.118 1 mg/g， respectively.There was little difference in the average content of cinnamaldehyde among other production regions.The contents of 2-methoxy cinnamaldehyde and coumarin in cinnamon from different producing areas were also different，the highest average content of 2-methoxy cinnamaldehyde was 3.022 8 mg/g in Guiping， the lowest average content was 0.380 6 mg/g in Fangcheng district.2-hydroxyl cinnamaldehyde belong to trace and trace components， and the content was 0.006 0-0.281 6 mg/g.The results of cluster analysis showed that 43 batches of cinnamon could be divided into two groups， but there was no inter-regional clustering effect.［Conclusion］The method for determination of medicinal components of cinnamon by HPLC is simple and reproducible， which can be used to identify cinnamon from different origins and provide the basis for the selection of best origin and quality evaluation.

Key words Cinnamon;HPLC;Medicinal components;Cluster analysis

基金项目 广西科技计划项目（桂科AD21238037）。

作者简介 郑美玲（1980—），女，广西罗城人，执业药师，从事药事管理工作。通信作者，高级农艺师，从事农业推广工作。

收稿日期 2022-09-02；修回日期 2023-06-28

中药肉桂为樟科植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl）的干燥树皮，国内分布在福建、广东、广西、云南等地，主产于广西、广东、云南［1］，而广西是国内肉桂药材的原产地和最大的产区，主要分布在桂平、平南、防城和岑溪等地［2］。肉桂可药食两用，具补火助阳、引火归元、散寒止痛、温通经脉之功效，用于治疗腰膝冷痛、虚阳上浮等［3-5］，肉桂中化学成分复杂，药效作用受组分间相互影响，单一成分难以合理评价肉桂的质量［6-7］。因此对其不同产地药材药效成分含量评价是肉桂药材急需解决及开展的研究之一。研究证明肉桂药材的主要活性成分是挥发油，而挥发油中主要成分为桂皮醛和肉桂酸［8］。该研究利用HPLC测定广西不同产地肉桂中桂皮醛、肉桂酸、肉桂醇、邻甲氧基肉桂醛、香豆素、2-羟基肉桂醛等6种药效成分的含量［9］，可初步确定不同产地肉桂中6种药效成分含量水平；同时参照2020年版《中华人民共和国药典》一部肉桂药材检测项下要求，结合聚类分析对收集自广西多个产地的43批次肉桂药材进行药效成分评价，按产地进行分类［6］，为广西不同产地肉桂质量评价及控制提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 仪器。

Ultimat 3000型高效液相色谱仪（赛默飞世尔科技公司）；FS-100型粉碎机（鹤壁市英泰电子电器有限公司）；FR2224CN型电子天平［奥豪斯仪器（常州）有限公司，精度0.01 g］；AUW120D型分析天平（日本岛津公司，精度0.01 mg）；SF-TGL-16M型离心机（上海菲恰尔分析仪器有限公司）；KQ5200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.1.2 试剂。

桂皮醛（CDAA-280568，纯度99%）、香豆素（CDAA-280338，纯度99%）、肉桂醇（CDAA-280569，纯度99%）、肉桂酸（CDAA-280566，纯度99%）标准样品（上海安普实验科技股份有限公司）；2-羟基肉桂醛（Lot6593，纯度≥98%）、邻甲氧基肉桂醛（YT20071203，纯度99%）标准样品（Stanford Analytical Chemicals Inc）；乙腈（色谱纯，北京迈瑞达科技有限公司）；甲醇（色谱纯，北京迈瑞达科技有限公司）。

1.1.3 肉桂样品。

从广西平南、桂平、岑溪、藤县、东兴、防城等不同产区采集 43批次肉桂药材，规格均为桂通，所有样品无霉坏和虫蛀。经广西壮族自治区林业科学研究院肉桂所李军集高级工程师鉴定为樟科植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl）的干燥树皮。样品信息见表1。

1.2 试验方法

1.2.1 标准样品溶液的制备。

分别取桂皮醛、肉桂醇、肉桂酸、香豆素、邻甲氧基肉桂醛、2-羟基肉桂醛对照品适量，精密称定，分别置10 mL容量瓶中，加入70% 甲醇至刻度，摇匀。分别得7 413.0、2 000.0、5 625.0、1 112.0、1 635.0、1 156.0 μg/mL 的对照品储备液。

分别取桂皮醛、肉桂醇、肉桂酸、香豆素、邻甲氧基肉桂醛、2-羟基肉桂醛对照品储备液100、400、100、400、400、400 μL 置于同一25 mL容量瓶中，用70% 甲醇定容，得到浓度为32.000、17.792、26.160、18.496、29.652、22.500 μg/mL的肉桂醇、香豆素、邻甲氧基肉桂醛、2-羟基肉桂醛、桂皮醛、肉桂酸混合对照品使用液。

1.2.2 样品溶液的制备。

分别取广西不同产地的肉桂样品进行粉碎，过三号筛，得肉桂粉末。精密称定0.5 g肉桂粉末移入50 mL离心管，加入25 mL 70%甲醇，超声30 min（功率350 W，频率35 kHz），超声过程适当换水避免温度过高。离心，取上清液至50 mL容量瓶中。精密加入10 mL 70%甲醇溶液至有残渣的离心管内，同法超声处理一次，离心，将上清液转移至同一容量瓶中，70%甲醇定容，摇匀。0.22 μm有机滤膜过滤，待测。

1.2.3 色谱条件。

色谱条件参照2020版《中国药典》和相关文献［10］进行调整。色谱柱为XTERRA MS C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸水（B）（洗脱梯度：0～1 min，25% A；1～15 min，25%→38% A；15～35 min，38%～45% A）；波长265 nm；柱温25 ℃；流速0.8 mL/min；进样量10 μL。

2 结果与分析

2.1 方法学考察

2.1.1 线性关系的考察。

分别精密吸取混合对照品使用液16.8、33.0、67.0、168.0、337.0 μL加入1 mL 70%甲醇中稀释，得到5个不同浓度的混合对照品溶液，第6个浓度直接取1 mL置进样瓶中，一共得到6个浓度的混合对照品溶液。按色谱条件进样，以浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）绘图，得到各成分回归方程，结果表明（表2），各成分的线性关系良好（r≥0.999 3），可用于肉桂样品中药效成分的测定。

2.1.2 精密度试验。分别精密称取桂皮醛、肉桂醇、肉桂酸、香豆素、邻甲氧基肉桂醛、2-羟基肉桂醛对照品，按“1.2.1”制备，按“1.2.3”色谱条件连续进样，进行色谱测定。从表3可以看出，各成分相对保留时间RSD在0.06%～ 0.19%，相对峰面积RSD在0.15%～ 3.90% ，表明仪器精密度良好。