液相色谱串联质谱法测定香蕉中噻虫胺残留量的不确定度评定

Uncertainty Evaluation for Determination of Clothianidin Residue in Banana by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

AN Shuangdi， LUO Shuwen，LI Yanyan， QI Dieming， LI Zetao （Lanzhou Zhongjianke Testing Technology Co.，Ltd.，Lanzhou 73ooo0， China）

Abstract： The content of clothianidin in banana was determined by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. According to the determination process， a series of uncertain factors such as sample weighing， standard solution preparation， curve fiting，sample processing and repeatability test were analyzed，and the uncertainty was systematically evaluated.The results showed that the content of clothianidin residue in banana was 0.042 6mg⋅kg^-1 ， and the expanded uncertainty was 0.0026mg⋅kg^-1 0 k=2 .Theuncertainty mainly came fromcurve fiting and sample repeated measurement. This study provides a scientific basis for improving the accuracy and reliability of the determination results of clothianidin residue in banana.

Keywords： banana; clothianidin; uncertainty; liquid chromatography-tandem mass spectrometry

噻虫胺是一种新烟碱类杀虫剂，具有高效、广谱、内吸性强等特点，广泛应用于农业生产中以防治多种害虫。然而，不合理使用噻虫胺可能导致其在农产品中残留，对人体健康和生态环境造成潜在威胁[1]。香蕉作为一种常见的热带水果，在种植过程中可能会使用噻虫胺来防治病虫害[2]。因此，准确测定香蕉中噻虫胺残留量至关重要。由于检测过程中存在影响结果的各种因素，必然会存在不确定度。评定测量结果的不确定度，有助于判定测量结果的可靠性，为质量控制和风险评估提供依据。

本研究依据《食品安全国家标准植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》（GB23200.121—2021）[采用液相色谱串联质谱法检测香蕉中噻虫胺残留量，依据《测量不确定度评定和表示》（JJF 1059.1—2012）[4、《化学分析中不确定度的评估指南》（CNAS-GL006：2019）[5对测定结果的不确定度进行评定。

1材料与方法

1.1 材料与试剂

香蕉样品，市场购买。

噻虫胺标准品（纯度 ⩾99% ），CAS 210880-92-5；乙晴（色谱纯），德国Merck公司；乙酸乙酯（色谱纯），美国Fisher公司；丙酮（色谱纯）；净化管（ 150mg 无水硫酸镁、 50mgN- 丙基乙二胺粉末、25mg 石墨化炭黑粉末）、萃取盐包（主要成分为4g 硫酸镁、 1g 氯化钠、 1g 柠檬酸钠、 0.5g 柠檬酸氢二钠），逗点生物；试验用水为超纯水。

1.2仪器与设备

1290/6460C液相色谱/质谱联用仪，美国安捷伦科技有限公司；XSE105DU电子天平，梅特勒公司；3H24R1高速离心机，湘仪离心机仪器有限公司；EVA80全自动平行浓缩仪，睿科仪器有限公司；MTV-100多管涡旋混合仪，上海奥盛公司；MX-S混匀器，美国Scilogex；移液枪，德国Eppendorf;10mL 容量瓶，泰兴市新华玻璃制品厂。

1.3 实验方法

1.3.1 标准溶液的配制

准确称取噻虫胺标准品 9.86mg ，用甲醇定容至 10mL 容量瓶中，涡旋混匀，得到质量浓度为986μg⋅mL^-1 的噻虫胺标准储备液，用甲醇稀释成质量浓度为 1μg⋅mL^-1 的标准中间液，备用。

用移液器移取一定量的噻虫胺标准中间液，用空白基质溶液逐级稀释成浓度为5、10、20、50、100μg⋅L^-1 和 200μg⋅L^-1 的基质标准工作曲线溶液，涡旋混匀，待测定。

1.3.2 样品前处理

将香蕉去皮，切碎，称取 10g 试样，加人10mL 乙酸-乙腈（ 1% ）溶液，涡旋振荡 1min 加入盐包，剧烈振荡 1min ，以 4500r⋅min^-1 离心 5min 。吸取全部上清液至净化管中，涡旋混匀1min 。 4500rmin^-1 离心 5min ，移取 1mL 上清液过0.22μm 微孔滤膜，待测。

1.3.3 仪器条件

（1）色谱条件。色谱柱： C₁₈ （ 50mm×2.1mm ，1.8μm ）；流动相：A为甲酸水（ 0.1% ），B为乙腈；流动相流速： 0.3mL⋅min^-1 ；柱箱温度： 40°C ；进样体积： 5μL ；流动相洗脱条件见表1。

（2）质谱条件。离子源电离正离子模式；多反应监测；电离喷雾电压： 3500V ；驻留时间： 35ms ：离子源温度： 350‰ ；辅助加热器： 0.3MPa ；噻虫胺特征离子对：250.1/169.1、 250.1/132 ；锥孔电压：55V ；碰撞气： N₂ ；碰撞电压： 11V 、 10V 。

1.3.4数学模型

根据外标法对样品中噻虫胺残留量进行计算，建立数学模型为

式中： X 为试样中噻虫胺残留量， mg⋅kg^-1 ; c 为试样中噻虫胺残留量浓度， μg⋅L^-1 ； V 为试样提取液的体积，mL; f 为稀释因子； m 为称取试样的质量， g

2 结果与分析

2.1不确定度来源分析

根据样品测量过程和数学模型分析，将不确定度的来源归纳为以下几个方面： ① 样品的称量； ② 标准溶液的配制； ③ 拟合标准曲线； ④ 样品处理过程；⑤ 样品重复性测量。

2.2 不确定度评定

2.2.1样品称量引入的不确定度

依据电子天平计量证书，称样量 m⩽50g 时，允许误差为 ±0.0005g 。称量 10g 样品，按均匀分布计算（ ），样品称量引入的标准不确定度为

则样品称量引入相对标准不确定度为

2.2.2样品处理过程引入的不确定度

按照1.3.2方法进行样品前处理，该过程中产生不确定度主要由移液器和溶液温度变化引入。 10mL 可调移液器的允许误差为 ±0.6% ，按照均匀分布（ ，移液器引入的标准不确定度为

则移取 10mL 液体时，移液器引入的相对标准不确定度为

实验室温度在（ 20±5 ） C ，此时有机溶剂的体积膨胀效果明显大于移液器自身体积变化，因此只需要考虑乙腈溶剂的体积膨胀变化。 20^∘C 时，乙腈的热膨胀系数为 0.00137^∘C^-1 ，按照均匀分布（ ），则由温度引入的标准不确定度为

则由温度引入的相对标准不确定度为

则样品处理过程引入的合成相对标准不确定度为

2.2.3 标准溶液配制引入的不确定度

根据标准物质证书信息，标准品的纯度为99.8% ，其扩展不确定度为 0.5% ， k=2 ，则标准品引入的相对标准不确定度为

标准品称量过程中，称样量 m⩽5g 时，电子天平最大允许误差为 ±0.05mg ，称取标准物质9.86mg ，按照均匀分布（ ），标准品称量引入的相对标准不确定度为